сирибози [5-7,11]. Підвищення ефективності зв'язування отримують за рахунок модифікації азотистих основ [22,23], а також залишку дезоксирибози [6,16-21]. Для підвищення ефективності зв'язування з білками і поліпшення транспорту роблять кон'югацію з лігандами різної природи [20,24-32]. У ряді випадків приєднані хімічні конструкції виконують роль каталізаторів фосфодіефірних зв'язків в РНК [3,10]. br/>
1.2.2 Модифікації фосфатної групи
Розщеплення нуклеазами фосфодіефірних зв'язків в ДНК відбувається через ефективне зв'язування в активному центрі і з використанням кислотно-основних властивостей фосфатної групи. Один із способів підвищити стійкість зв'язків ODN до дії нуклеаз - змінити електронну конфігурацію фосфатної групи. Для цього один з незв'язаних атомів кисню замінюють атомом іншого елемента. Одним з перших в якості такого елемента використовували сірку, в результаті чого були отримані фосфоротіоати (модифіковані антисмислового олігонуклеотиди першого покоління; див. рис. 2, II). br/>В
Рис. 2. ДНК (I) і фосфоротіоат (II). br/>
Фосфоротіоати проявили високу стійкість до дії нуклеаз, однак така модифікація значно підвищила токсичність ODN [5,6].
Заміною незв'язаного атома кисню фосфатної групи метильной групою отримують метілфосфонати (див. рис. 3, III), що проявляють високу стійкість до дії нуклеаз. Модифікацію часто проводять тільки по кінцевим нуклеотидам, що призводить до зменшення токсичності [7]. p align="justify"> Якщо замінити атом кисню фосфату залишком BH 3 - , виходять боранофосфати. Залишок-BH 3 - ізоелектронними атому кисню в фосфодіефірних зв'язках, за рахунок чого боранофосфати зберігають свій негативний заряд, добре розчиняються у воді і формують комплекси з РНК-мішенню. Також цей залишок ізоелектронними і ізостерічен метильной групі, завдяки чому від них слід чекати властивості, аналогічні властивостям метілфосфонатов, такі як стійкість до нуклеаз [11].
В
Рис. 3. Метілфосфонат (III) і боранофосфат (IV). br/>
1.2.3 Модифікації залишку цукру
Модифікації фосфодіефірних зв'язків не роблять значного ефекту на стабільність гетеродуплекса ДНК - РНК. Тому, крім модифікованих олігодезоксінуклеотідов, представляють інтерес так звані модифіковані антисмислового олігонуклеотиди другого покоління - це заміщені по 2 -гідроксильної групі залишку рибози олігорібонуклеотіди. Така модифікації також підвищує стійкість до дії нуклеаз. Хоча РНК значно менш стійкі до впливу навколишнього середовища в порівнянні з ДНК за рахунок наявності 2 -OH-групи, сам...
