ію, а й. охороняти дегазованої розчинники від контакту з повітрям, що приводить до розчинення газів.
Вартість складних дегазуючих пристроїв у сумі з вартістю клапанної системи приблизно зрівнюють ціну приладів, що працюють з градієнтом високого і низького тиску. Проте якщо у дослідника виникає необхідність у градієнті з трьох або чотирьох розчинників, прилад з градієнтом низького тиску за інших рівних умовах виявиться дешевше.
Таким чином, підсумовуючи переваги і недоліки пристроїв для створення градієнта високого і низького тиску, можна зробити наступні висновки.
Пристрій для створення градієнта високого тиску протягнуто і стабільно в роботі, не вимагає особливої дегазації розчинників, легко перебудовується для препаративної, полумікро-і мікроколоночной роботи. Воно може працювати з відносно дешевими насосами з кроковим двигуном і одним плунжером, працюючими по циклу: повільна подача - швидке перезаполненіе. Воно може мати вбудовані в насосні лінії і не викликають особливих проблем непротічні манометри, демпфери великого обсягу, колонки зі спеціальними сорбентами, В«полирующимиВ» один або обидва розчинника, - все це не позначається на відтворюваності і точності градієнта. Пристрій для створення градієнта низького тиску повинно обов'язково мати надійну систему глибокої дегазації, без якої стабільна робота неможлива. Це може бути або система дегазації продувкою розчинників безперервним струмом гелію в процесі роботи (великий струм спочатку, і повільний для підтримки дегазованого стану); витрата гелію при цьому значний. Можна використовувати систему динамічної дегазації розчинників при їх проходженні через напівпроникні фторопластові трубки з полімеру особливого сорту, що знаходяться у вакуумі; вона коштує досить дорого, але дозволяє уникнути витрати гелію і отримати розчинники, з яких видалено більше 99% розчинених газів. Пристрій для створення градієнта низького тиску повинно працювати з насосами, усмоктувальними і подавальними розчинники; їх неможливо використовувати для мікроколоночной і важко - Для препаративної роботи великої продуктивності. Програматори градієнта створюються, як правило, на базі персональних мікроЕОМ з об'ємом пам'яті від 48 до 64 К. Запис програм градієнта ведеться на гнучких дисках або ж з використанням касет і магнітофонів. При роботі з більш старими моделями потрібно щоденний набір програм оператором. Якщо для створення градієнта і управління ім використовують мікро-ЕОМ з досить великим обсягом пам'яті і можливістю гнучкого програмування з використанням мови Бейсік, часто цю ж ЕОМ використовують і для обробки отриманих хроматограм. Змішувачі являють собою камеру невеликої місткості з нержавіючої сталі з вміщеній всередину магнітною мішалкою, привід якої знаходиться зовні. Для однорідності перемішування в деяких моделях використовують подвійну камеру з двома магнітними мішалками від одного приводу. Обсяг таких змішувачів зазвичай становить 1-1,5 мл. Якщо змішання здійснюється неефективно, розчинник у колонку і далі в детектор надходить негомогенний. Це призводить до порушення хроматографічного процесу у колонці і помітно збільшує шуми детектора. Якщо хроматографіст забув включити в мережу магнітну мішалку, негомогенності складу розчинника і шуми детектора досягають максимального значення.
Статичні змішувачі, представляють собою канали складної форми, призначені для змішування за рахунок зіткнення потоків, менш ефективні. Для препаративної роботи потрібні змішувачі із значно більшою місткістю, розраховані на роботу з великими подачами розчинників. Для мікроколоночной ВЕРХ з градієнтом розчинника необхідний мікросмесітель місткістю менше 100 мкл; спроба використовувати змішувач на 1-1,5 мл призводить до сильного перекручування форми градієнта. Це легко зрозуміти, оскільки витрата) астворітеля при роботі з микроколонки діаметром 1 мм становить 30 мкл/хв. Розчинник у великому змішувачі буде-(Амен новим за 30-50 хв. p> 1.3 Інжектором
Інжектори для введення проби повинні забезпечувати введення проб від 0,1 мкл до декількох мілілітрів (Відповідно в мікро-і препаративних колонках) з високою воспроізводімосгью при тисках до 30-50 МПа. Розмивання проби в інжекторі має бути мінімальним. Інжектори повинні працювати при підвищених температурах і в середовищі активних розчинників і реагентів, при цьому їх ущільнення повинні бути механічно міцними. Було запропоновано велику кількість конструкцій інжекторів різних типів, багато з яких через складність виготовлення, і ненадійності роботи, високої вартості не отримали широкого розповсюдження. Розглянемо типи інжекторів, що використовуються в ВЕРХ. Найпростішим є інжектор із зупинкою потоку (В«стоп флоуВ»). Він включає кран для перекривання потоку перед інжектором і трійник, до якого приєднані колонка, підвідний розчинник капіляр і заглушка (рис. 1.8). Коли потрібно ввести пробу, зупиняють насос, перекривають кран, відвертають заглушку, набирають про...
