ини легко витягуються водою і водно-спиртовими сумішами при нагріванні. Потім отримані екстракти піддають очищенню з використанням різних методів (фракціонування малополярний органічними розчинниками для видалення ліпофільних або низькомолекулярних сполук, колонкової хроматографії, у тому числі на сефадексе G - 50 і G-I00).
У промислових умовах дубильні речовини витягують з сировини гарячою водою в батареї дифузорів (перколяторів) за принципом протитечії.
Відомий метод виділення фенольних сполук, у тому числі і деяких компонентів дубильних речовин, осадженням з водних або спиртово-водних розчинів солями свинцю. Отримані опади потім обробляють розбавленою сірчаною кислотою [7].
10. Методи аналізу лікарської рослинної сировини
. 1 Дійсність (ідентифікація)
А. 0,1 мл розчину S, приготованого як зазначено в розділі «Випробування», доводять водою Р до об'єму 5 мл і додають 0,1 мл розчину заліза (III) хлориду Р1. З'являється чорне з синім відтінком забарвлення, яке переходить в зелене при додаванні 1 мл кислоти сірчаної розведеної Р.
В. До 1 мл розчину S додають 3 мл розчину 1 г/л желатину Р. Суміш стає каламутною і утворюється пластівчастий осад.
С. 0,1 мл розчину S доводять водою Р до об'єму 5 мл і додають 0,3 мл розчину барію гідроксиду Р. Утворюється зеленувато-синій осад [2].
. 2 Визначення танінів
Всі операції екстракції і розчинення проводять у захищеному від світла місці.
У круглодонную колбу місткістю 250 мл всипають вказане у приватній статті кількість подрібненого зразка лікарської рослинної сировини (180) або екстракту і додають 150 мл води Р. Нагрівають на водяній бані протягом 30 хв. Охолоджують під проточною водою і кількісно переносять у мірну колбу місткістю 250 мл. Обполіскують круглодонную колбу і зливають промивні води в мірну колбу, після чого обсяг доводять водою Р до 250,0 мл. Дають осісти твердим частинкам і фільтрують рідину через фільтрувальний папір діаметром 125 мм. Перші 50 мл фільтрату відкидають.
У разі рідкого екстракту або настоянки розбавляють вказану кількість рідкого екстракту або настоянки водою до 250,0 мл. Розчин фільтрують через фільтрувальний папір діаметром 125 мм. Перші 50 мл фільтрату відкидають.
Загальна кількість поліфенолів. Розбавляють 5,0 мл фільтрату до 25,0 мл водою Р. Змішують 2,0 мл отриманого розчину з 1,0 мл фосфорномолібденовольфрамового реагенту Р і 10,0 мл води Р і доводять об'єм розчину до 25,0 мл розчином натрію карбонату Р концентрацією 290 г/л. Через 30 хв вимірюють оптичну щільність (2.2.25) при довжині хвилі 760 нм (А 1), використовуючи воду Р як розчин порівняння.
Поліфеноли, що не адсорбовані шкірним порошком. До 10,0 мл фільтрату додають 0,10 г шкірного порошку ФСО і інтенсивно перемішують протягом 60 хв. Відфільтровують і розбавляють 5,0 мл фільтрату до 25,0 мл водою Р. Змішують 2 мл цього розчину з 1,0 мл фосфорномолібденовольфрамового реагенту Р і 10,0 мл води Р і обсяг доводять до 25,0 мл розчином натрію карбонату Р концентрацією 290 г/л. Через 30 хв вимірюють оптичну щільність (2.2.25) при довжині хвилі 760 нм (А 2), використовуючи воду Р як розчин порівняння.
Стандарт. Безпосередньо перед використанням розчиняють 50,0 мг пірогалолу Р у воді Р і доводять об'єм розчину до 100,0 мл тим же розчинником. Розбавляють 5,0 мл цього розчину до 100,0 мл водою Р. Змішують 2,0 мл отриманого розчину з 1,0 мл фосфорномолібденовольфрамового реагенту Р і 10,0 мл води і доводять обсяг до 25,0 мл розчином натрію карбонату Р з концентрацією 290 г/л. Через 30 хв вимірюють оптичну щільність при довжині хвилі 760 нм (А 3), використовуючи воду Р як розчин порівняння.
Розраховують процентний вміст дубильних речовин в перерахунку на пирогаллол за формулою (1):
, (1)
де: м1 - маса взятого зразка для аналізу, в грамах;
м2 - маса пірогалолу, в грамах.
Допускається проводити визначення дубильних речовин за методикою, зазначеної у приватній статті [16].
.3 Хроматографія
Для ідентифікації конденсованих дубильних речовин отримують спиртове (95% етиловий спирт) і водне витягання і проводять паперову та тонкошарову хроматографію. В якості стандартного зразка використовують ДСО катехина [17]. Роздільна здійснюють в системах розчинників бутанол - кислота оцтова - вода (БУВ) (40:12:28), (4: 1: 2), 5% оцтова кислота на папері марки Filtrak і пластинках Silufol. Виявлення зон речовин на хроматограмі проводять в УФ-світлі, з подальшою обробкою 1% розчином железоаммоніевие квасцов або 1% розчином ваніліну, концентрованою кислотою хлористов...
