p> Рис .5.1. Схема пристрої для суспензійного заповнення колонок:
1-капіляр для подачі розчинника від насоса; 2-верхній фітінг резервуара; 3-резервуар для суспензії; 4-нижній фітінг резервуара; 5-предколонка; 6-розсвердлений під зовнішні діаметри колонки і предколонкі фітінг; 7-колонка; 8-фітінг колонки; 9-злив розчинника в мірний циліндр
Сорбент в заповненої традиційним методом В«насипай і ущільнюють постукуваннямВ» колонці для КХ після того, як в неї подавали розчинник, ущільнювався з утворенням пустот на початку колонки, при цьому форма піків виходила неправильною, а ефективність колонки - низькою.
Розробка суспензійних методів приготування колонок дозволила різко підняти ефективність і використовувати сорбенти розміром 10 мкм і менше. Однак суспензійний метод ще недостатньо відпрацьований, і існує безліч його варіантів, кожен з яких має свої особливості. Часто той варіант, який описаний в літературі, не дає в інших руках хороших результатів, так як неможливо описати і відтворити всі деталі процесу суспензійний упаковки.
Коротенько процес суспензійний упаковки виглядає наступним чином. Зважують необхідну для колонки даного розміру кількість сорбенту, заливають його розчинником і готують суспензію, ретельно перемішуючи суміш, нередKO з використанням ультразвуку. Після цього суспензію поміщають в резервуар, сполучений з колонкою, на кінці якої встановлений фітінг з фільтром (рис. 5.1), і під тиском 20-60 МПа продавлюють суспензію через колонку, подаючи резервуар насосом розчинник. Суспензія фільтрується на фільтрі колонки, формуючи упорядкований шар сорбенту, що забезпечує ефективне розділення при ВЕРХ. Зупиняють потік розчинника, дають тиску впасти до нуля і знімають колонку. Акуратно видаляють надлишок сорбенту з кінця колонки, приєднуйся до резервуару, і приєднують другий фітінг з фільтром. Отриману таким чином колонку встановлюють на хроматограф, прокачують через неї до встановлення рівноваги робочий розчинник, після чого вона готова до роботи.
При всій удаваній простоті процесу суспензійний упаковки колонок для ВЕРХ у початківця хроматографіста, так само як і у який має досвід, але початківця працювати з новим сорбентом, виникає ряд питань. Який розчинник взяти для приготування суспензії? Яку концентрацію суспензії використовувати? Як краще диспергувати сорбент? Якої форми та об'єму застосувати резервуар для суспензії? Який насос краще для подачі розчинника? Який напрям потоку розчинника вибрати і який взяти розчинник? Який тиск використовувати і скільки розчинника подавати? Скільки часу знижувати тиск? Як вирівнювати шар сорбенту і встановлювати фітінг і фільтр? На кожне питання існує ряд відповідей, а вибір вдалої комбінації варіантів завжди обумовлений не тільки власним досвідом, але і якими-небудь загальними уявленнями, літературними даними і, нарешті, що є в наявності обладнанням.
Почати доцільно з сорбенту, який упаковують в колонку. Насамперед бажано ...
