Теми рефератів
> Реферати > Курсові роботи > Звіти з практики > Курсові проекти > Питання та відповіді > Ессе > Доклади > Учбові матеріали > Контрольні роботи > Методички > Лекції > Твори > Підручники > Статті Контакти
Реферати, твори, дипломи, практика » Курсовые проекты » Дослідження клітинного циклу методом проточної цитометрії

Реферат Дослідження клітинного циклу методом проточної цитометрії





успензії є абсолютно новим методом каріотипування. Тому в дослідженнях такого роду основний акцент робиться на розробці ефективних методів сепарації інтактних хромосом із збереженням їх цілісності та морфологічної структури.

У представлених роботах найчастіше досліджуваної моделлю є метафазні хромосоми, отримані з клітин китайського хом'ячка і людини, приготовані для прямого каріотипування, а також для аналізу каріотипу з короткочасним або тривалим культивуванням клітин. Для аналізу генетичного матеріалу використовуються Однопараметрична проточні системи, де проводиться аналіз та сортування хромосом за інтенсивністю флуоресценції в комплексі з такими флуорохромами, як PI, EtBr, Ho 33258, а також застосовуються високоразрешающем проточної цитометрії з двухлазерной системою, які забезпечують біваріантний аналіз ДНК, мічений двома флуорохромами. Здебільшого використовують поєднання Але 33258, специфічно зв'язується з АТ-багатими ділянками ДНК, і хромомицина А 3 , селективно взаємодіє з ГЦ-парами.

Дані, отримані за допомогою автоматизованих систем, представляються у вигляді гістограм, так званих проточних каріограмм. Про якість аналізу свідчить високий дозвіл гістограм, Які характеризуються множинними вузькими піками, що відносяться до різних класів хромосом. Кількість піків в більшості випадків відповідає набору хромосом, яке характерно для даного індивідуума. При дослідженні клітин зародка китайського хом'ячка методом проточного каріотипування на етапі експоненціального зростання були отримані всі 11 піків, відповідні 11 парам хромосом самки, досліджуваного тварини (J.A.Steinkamp, ​​1984).

Зазвичай застосовуються цитогенетичні методи не дозволяють ідентифікувати Y-хромосому з G-і F-груп хромосом людини. Застосування проточної цитометрії дозволяє вирішити це завдання. Так, на лімфоцитах, виділених з периферичної крові донорів-чоловіків, з короткочасним культивуванням (52 год) і добавлентем колцеміда була показана можливість визначення позиції Y-хромосоми по інтенсивності ДНК-флуоресценції (Але 33258) у вигляді піку на проточній каріограмме. У 17 обстежуваних донорів позиція Y-хромосоми на гістограмі варіювала. У деяких спостереженнях пік Y-хромосоми знаходився між 19 і 20 хромосомами, в інших - між 20-й і 17-й. У 70% випадків Y-хромосома була контаміновані з 20-ї.

З робіт, присвячених хромосомному аналізу, відомо, що при використанні однолазерний проточної системи може бути ідентифіковано близько 15 хромосом людини, виключаючи Y-хромосому. Застосування двухлазерной системи (FACS-11) дозволяє по інтенсивності флуоресценції розпізнати близько 20 популяцій хромосом у метафазних пластинках і, що особливо цінно, ідентифікувати маленькі аутосоми людини (M.Lalande, RRSchreck, R.Hoffman, SA Latt, 1985). У цьому випадку крім флюорохромів Але 33258 і хромомицина А 3 в комплекс субстрат-флюорохром вводиться третій барвник: нетропсін або дістаміцін А. Це сприяє отриманню до...


Назад | сторінка 6 з 13 | Наступна сторінка





Схожі реферати:

  • Реферат на тему: Визначення впливу води зі зміненим ізотопним складом на функціональні особл ...
  • Реферат на тему: Безпека життєдіяльності людини у процесі аналізу системи "людина-машин ...
  • Реферат на тему: Геоінформаційні технології. Автоматизовані системи збору та зберігання і а ...
  • Реферат на тему: Роль генетичного аналізу популяцій в оптимізації мережі особливо охоронюван ...
  • Реферат на тему: Роль генетичного аналізу популяцій в оптимізації мережі особливо охоронюван ...