ує високу ефективність колонок.
Комбінація колонок з зорбаксамі PSM-60 і PSM-1000 дає лінійну калибровочную залежність в діапазоні від 2-10 2 до 2-10 6 . Фірмою В«ДюпонВ» випущені В«трімодальниеВ» колонки, які містять суміш зорбаксов PSM-60, PSM-300 і PSM-3000, з лінійною калібрувальної залежністю в межах 10 2 -10 7 Для забезпечення необхідної селективності розділення 'рекомендується використовувати набори з двох і більше колонок. Зорбакс PSM, мабуть, є кращим з жорстких сорбентів, що не дназначенних для дослідження біополімерів. Калібрувальні криві для жорстких сорбентів по полістиролу в тетрагідрофурані наведені на рис. 8.
Пористі скла в немодифікованому вигляді останнім часом застосовують рідко, оскільки вони мають значно більшу адсорбційної активністю, ніж силікагель. Відмінною особливістю пористих стекол є надзвичайно узкoe розподіл пор за розміром, тому вони характеризуються дуже високою селективністю розділення, але в малому діапазоні молекулярних мас.
До сорбентам для високоефективної ексклюзіонной хроматографії білків, ферментів і інших біологічних об'єктів пред'являються значно жорсткіші вимоги щодо інертності поверхні, ніж до сорбентам для розділення синтетичних полімерів. Кислі гідрофільних силанольних пруппи силікагелю мають високу адсорбційної активністю, проявляють слабкі іонообмінні властивості і здатні денатурувати білкові молекули. Тому поверхня жорстких сорбентів дуже ретельно модифікують щепленням моношарів нейтральних гідрофільних органічних гpyпn. До таких сорбентам відносяться ц-бондагель Е і матеріали, містять гліцерільние групи. Поверхня ц-бондагеля Е модифікована Аліфатичні-ми ефірними групами. Колонки з цим сорбентом можна використовувати з будь-якими розчинниками від пентану до буферних розчинів в області рН від 2 до 8. Вони характеризуються високою роздільною здатністю, але через малу робочого об'єму (приблизно 1,2 мл на колонку) потрібно особливо точна подача рухомої фази.
Якість одержуваних сорбентів в чому визначається повнотою реакції. Теоретично в зазначену реакцію може вступити приблизно половина всіх сіланола-них груп. Однак залишилися групи не можуть взаємодіяти з сорбентами, так як екрануються гліцерільнимі групами. При недостатній мірі покриття повного екранування НЕ пооісходіт і починає проявлятися В«силанольная активністьВ» незаміщених груп. Зміст таких активних груп, що характеризує рівень дезактивації сорбентів, часто оцінюють за ступенем збереження ферментативної активності лабільних ферментів після їх пропускання через хроматографическую колонку.
Найбільш відомими представниками матеріалів зазначеного типу є глікофаза CPG, одержувана з пористих стекол марки CPG (Controlled Porous Glass), ліхросфер діол і сінхропак GPC. Ці гелі характеризуються досить високою інертністю: так, втрата ферментів при хроматографування на ліхросфере діол зазвичай не перевищує 2-7%. Сорбенти сінхропак G...
