методів прямого підрахунку клітин:
- широко застосовуються в дослідженнях мікрофлори води та грунту;
ефективність такого підрахунку, як правило, в 10 - 10000 разів вище, ніж при підрахунку методом висіву, оскільки багато мікроорганізми не ростуть на поживних середовищах і врахувати їх можна тільки під мікроскопом;
дозволяє визначити загальну кількість клітин в одиниці об'єму (як живих, так і мертвих, або ці групи клітин окремо);
дає можливість отримати додаткову інформацію про розміри і морфології досліджуваного об'єкта;
виробляється швидше, більш дешевий, обладнання для його здійснення мається на кожній лабораторії.
Основне обмеження більшості методів даної групи - необхідність досить високих концентрацій клітин в одиниці досліджуваного субстрату.
Визначення кількості мікробних клітин нефелометріческім методом. Цей метод широко застосовується в мікробіологічних дослідженнях, оскільки дозволяє досить точно і порівняно швидко визначити кількість клітин в культуральному середовищі . В основі методу лежить вимірювання кількості світла, розсіяного суспензією клітин. Величину светорассеянія вимірюють за допомогою нефелометрія, спектрофотометрів або Фотоелектроколориметр. У цих приладах вимірюється первинний пучок світла, який проходить через пробу і, не відхиляючись, падає на фотоелемент. Зазвичай при цьому порівнюється інтенсивність світла, що проходить через суспензію клітин і через середовище без кліток. Для вимірювання світлорозсіювання вибирають світлофільтр, що забезпечує максимум пропускання світла даної суспензією. Живильне середовище для культивування мікроорганізмів, в якій передбачається визначати кількість клітин по розсіюванню, повинна бути оптично прозорою.
Визначення кількості життєздатних клітин шляхом висіву на поживні середовища (чашкове метод Коха). Суть методу підрахунку кількості клітин шляхом висіву полягає в висіві певного обсягу досліджуваної суспензії мікроорганізмів на агаризованому живильне середовище в чашках Петрі і підрахунку формуються колоній, беручи до уваги, що кожна колонія - потомство однієї життєздатної клітини. Існує багато варіантів методу:
В· При посіві на поверхню агару (метод Коха). Проводять у три етапи: приготування розведень досліджуваного матеріалу, посів на агаризованому середу в чашках Петрі і підрахунок сформувалися колоній.
В· Метод посіву в агаризованому середу здійснюють шляхом внесення в стерильну чашку Петрі суспензії мікроорганізмів з відповідного розведен...
