стерильності можна проводити двома методами: прямим посівом зразка в поживні середовища та мембранної фільтрацією. При прямому посіві випробуваний препарат попередньо розчиняють або суспендують і вносять у середу в кількості, що залежить від обсягу вмісту однієї одиниці: якщо в ампулі 1 мл, то весь обсяг, для ампул обсягу - мл засівають 1 мл, якщо обсяг становить 5-19 мл - 2 мл, для обсягу
- 100 мл - 2-4 мл, а при аналізі вмісту флаконів об'ємом більше 100 мл кращим є метод мембранної фільтрації.
Обсяг живильного середовища повинен в 10 разів перевищувати обсяг зразка для посіву. Посіви втіогліколевую середу інкубують при температурі 30-35 ° С, а в середовищі Сабуро - 20-25 ° С. Тривалість інкубації 14 діб. Інтерпретація результатів.
Посіви переглядають щодня і після закінчення періоду інкубації. Наявність росту мікроорганізмів оцінюють візуально по появі каламутності, плівки, осаду та інших ознак росту мікробів. Виявлений зростання підтверджують мікроскопією мазків, пофарбованих за Грамом. Препарат вважають стерильним при відсутності росту мікроорганізмів. При виявленні зростання хоча б в одній пробірці (колбі) випробування проводять повторно на такій же кількості зразків. При відсутності росту випробуваний препарат вважають задовольняє вимогам. У разі зростання мікроорганізмів при повтором посіві, морфологічно подібних з мікроорганізмами, виявленими в первинному посіві випробуваний препарат вважають нестерильним. Якщо виявлено інша морфологічна група, то випробування проводять втретє на подвійній кількості зразків. При відсутності росту в третьому випробуванні препарат вважають стерильним. Якщо хоча б в одній пробірці виявлено зростання, випробуваний препарат вважають нестерильним.
Фактори вірулентності мікроорганізмів. Характеристика ендо- та екзотоксинів
Відповідь: Вірулентність (лат. virulentus - отруйний) - ступінь патогенності даного штаму інфекційного агента щодо тварин певного виду при стандартних умовах природного або штучного зараження. Наприклад, бацила сибірської виразки є патогенною, тому що має властивість викликати захворювання на сибірку. Але штам однієї культури викликає захворювання і смерть через 96 годин, а інший - через 6-7 днів. Отже, вірулентність першого штаму більш висока, ніж другого.
Вірулентність збудника оцінюють за DLM (dosis letalis minima) - мінімальної смертельній дозі, рівної кількості мікробних клітин, яке викликає загибель 90% сприйнятливих тварин певного виду та DL50-дозі, що викликає загибель 50% тварин. Ступінь патогенності мікроба визначається факторами вірулентності: адгезією, інвазією і агресією.
Інвазивність (лат. invasio - нашестя, напад) - здатність мікроба долати захисні бар'єри організму, проникати в органи, тканини і порожнини, розмножуватися в них і пригнічувати захисні засоби макроорганізму. Інвазійні властивості патогенних бактерій забезпечуються за рахунок мікробних ферментів, так званих факторів розповсюдження (гіалуронідаза), капсул та інших хімічних компонентів мікробів. Це пов'язано з наявністю специфічних поверхневих структур, що пригнічують фагоцитоз або активність компліменту, а також з особливостями метаболізму, забезпечують розмноження збудника в організмі господаря.
Для поверхневих структур з антіфагоцітарной функцією Глінн (A. Glynn, 1972) пропонує назву «імпедіни».
У мікроорганізмів різних видів ці структури відрізняються за хімічною природою, токсичності, протективной активністю: капсула (в пневмококів - полісахаридна, у сібіреязвенной бактерії - глутаміл-полипептидная), Про- і К-антигени ентеробактерій та ін. Один і той же збудник може продукувати одночасно декілька компонентів різної хімічної природи, що діють на різні етапи фагоцитарного процесу. Біологічна активність структур залежить від кількості продуцируемого речовини, його будови і ступеня полімеризації.
Ряд збудників (сальмонели, бруцели та ін.) характеризується здатністю тривалий розмножуватися в макрофагах. Мається кореляція між чутливістю тварин певного виду до інфекції і здатністю збудника розмножуватися в їх макрофагах. Вважають, що в основі цього явища лежить спільністю молекулярної структури антигенів паразита і господаря. В силу імунологічної толерантності?? сти в організмі таких тварин відсутні відповідні антитіла на початковому етапі інфекції і паразит безперешкодно розмножується. Здатність розмножуватися в макрофагах може бути пов'язана також із стійкістю деяких поверхневих компонентів клітини до перетравлюється дії лізосомальних ензимів або з придушенням їх синтезу.
Прояви інвазивних властивостей бактерій значною мірою залежить від стану захисних сил макроорганізму. Вивчення молекулярної структури факторів інвазивності та механізму їх дії ма...
