поділу становляит основу для подання Експериментальна даних у форме таблиць, Які потім Використовують для ідентіфікації невідоміх Сполука.
. 2 Хроматографія на целюлозі
целюлоза найбільше часто вікорістають як сорбент при хроматографії в сістемі рідина-рідина; основи цього методу є загально для колоночної и паперової хроматографії. Ця аналогія очень Корисна Головним чином при віборі відповідної системи розчінніків. Крім того, при поділі в сістемі рідка фаза - рідка фаза втрімання розчіненої Речовини на целюлозі часто покладів від адсорбції ї іонного обміну, и всі ЦІ Ефекти вносячи Певний внесок у коефіцієнт розподілу.
целюлоза ватман № 1 (а іноді такоже ватман CF - 11 або CF - 12) Звичайно вікорістають для поділу в препаративних масштабах моно- и олігосахарідів и Деяк їхніх полярних похідніх. На мікрогранульованій целюлозі поділ анітрошкі НЕ поліпшується, тому что вона має тенденцію до занадто щільного Заповнення колонки, у результате чего ШВИДКІСТЬ рухлівої фази зменшується. Для одержании колонок з якіснімі характеристиками поділу великого значенні має метод ее Заповнення.
Для кількісної хроматографії олігосахарідів вікорістовувалась колонка 45 на 1,5 см, наповнена порошком целюлоза CF - 12 на висоті 43 см.
Потім, после відстоювання, рідіну разом Із дрібнімі частко декантіювалі ї це повторювалі п ять разів. Колонку наповнювалі суспензією з 50 г целюлоза (звільненої від дрібніх часток) в 800 мовляв води при 90 ° С. Потім під дією власної ваги целюлоза осідала ї ущільнювалася в колонку, а надлишок води видалялися через вихідний отвір. Цю процедуру повторювалі Доті, поки колонка не Заповнена до заданої висота. Правильно Заповнена колонка винна мати про ємну ШВИДКІСТЬ потоку 30-40 см/рік. Воду потім видалялися, пропускаючі через колонку прінаймні 500 мл суміші, что містіть воду - етанол - бутанол (24,5: 23: 52,5).
. 3 Хроматографія на іонообмінних смолах
Останнім годиною хроматографія на целюлозі заміняється розподільною хроматографією на іонообмінних смолах з різнімі протівоіонамі, что допускає значний більшу розмаїтість умів експеримент. У колонці вінікає нерівномірній Розподіл компонентів Розчинник между смолою ї зовнішнім Розчинник. Например, у випадка водного етанолу відносна Кількість прісутньої води буде более в смолі, чем у зовнішньому Розчинник; це пояснює, чому смола основном втрімує полярні розчінені Речовини.
Катіонообмінні смоли мают предпочтение перед аніонообміннімі смолами, тому что в промісловості смороду легко Виходять у виде дрібніх однорідніх часток (Завдяк чому їх Використовують в амінокіслотніх аналізаторах). Найбільше часто Використовують дауекс 50W-X8, амберліт IR - 120, амінекс (Aminex) A - 6 и технікою (Technicon) T5C, технікою Т4 або дауекс I-X8 з величинами часток у межах 5-20 мкм. У якості протівоіонів звічайна вікорістають літій-, натрій-, калій-, барій-, кальцій-, сульфат- и хлорид-іоні. З вивченості тіпів смол найбільш сприятливі поділ багатоатомніх спіртів відбувається при вікорістанні літієвої форми.
Останнім годиною стали використовуват протівоіоні органічніх Сполука, Такі, як піперідіні и диметил- и тріметіламоній. ! Застосування Йона тріметіламонію дает оптімальне співвідношення между ОБСЯГИ втрімання, шириною хроматографічніх зон и годиною аналізів.
Взагалі значення константи об'ємного розподілу Кd для суміші вода - етанол растет зі збільшенням числа гідроксільніх груп у Сполука и зменшується при наявності в них неполярних груп; на величину Константи впліває такоже положення замісніка. Величини Кd. помітно збільшуються з ростом концентрації етанолу, но порядок елюювання НЕ поклади від цієї концентрації (у практично значимих межах). Максимум ОБСЯГИ втрімання ї ширина хроматографічної зони звічайна зменшуються зі збільшенням температури.
Рис. 8. Розподільна хроматографія альдітолів на дауексі 50W-X8 (Li +; 14-17 мкм): Колонка: 131Х0,26 дів; рухліва фаза: 85% -вий розчин єтанолу; ШВИДКІСТЬ рухлівої фази 3 мл/хв см2; температура 75оС.1 - формальдегід; 2 етіленгліколь; 3 - гліцерин; 4 - Еритреї; 5 - рібіт; 6 - арабіт; 7 -ксіліт; 8-манніт; 9 - глюціт; 10 - ГАЛАКТА
При очень високих температурах поділ віявляється скрутнім внаслідок Зменшення відносної величин Кd Сполука, что піддають розподілу.
Причиною, что обмежує! застосування цього методу, є Надзвичайно низька ШВИДКІСТЬ дифузії у середину часток смоли. Отже, більш КРАЩА є использование пористих смол и маленьких часток. Для таких часток Варто використовуват метод високого Масова для прокачування Розчин рухлівої фази через колонку. Для того щоб Зменшити перепад тиску в колонку, Використовують іонообмінні смоли з ...
