ріалу та умов транспортування.
У бактеріологічну лабораторію доставляється матеріал у такому обсязі:
1. Ліквор для первинного посіву, бактеріоскопії і серологічних досліджень у кількості не менше 1,0 мл.
2. Ліквор в 0.1% напіврідкому агарі (середа "збагачення") для бактеріологічного накопичення культури, 0,5 мл ліквору засівають в 5,0 мл напіврідкого агару негайно біля ліжка хворого.
3. "Товста крапля "крові для бактеріоскопії.
4. Кров в рідкій живильному середовищі або в 0,1% напіврідкому агарі (середа збагачення) для бактеріологічного накопичення культури, 5,0 мл крові засівають в 50,0 мл середовища збагачення.
5. Кров у кількості не менше 2-х мл для серологічних досліджень (РПГА, ВІЕФ, ЛА та ін.)
Матеріал для бактеріологічних і серологічних досліджень доставляється в бактеріологічну лабораторію негайно після забору в теплому вигляді (t 0 = +37 0 С) у спеціально обладнаних контейнерах.
При неможливості негайної доставки допускається зберігання патологічного матеріалу в умовах термостата при +37 0 С протягом 18 годин.
В
Бактеріологічне дослідження спинномозкової рідини хворого
1-й день дослідження
Спинномозкову рідина (СМР) в кількості 2 - 5 мл беруть у хворого відразу ж при вступі до стаціонару (бажано до початку антибактеріальної терапії) з дотриманням всі правил асептики. Взяття ліквору виробляється персоналом в масках. p> Першу порцію СМЖ (Близько 1,0 мл) беруть в окрему пробірку для проведення загального ликворологического дослідження. Другу порцію, призначену для бактеріологічного дослідження наливають у стерильну пробірку (не менше 1.0 мл) і частково засівають в 0,1% напіврідкий агар (0,5 мл СМЖ додають в 5 мл 0,1% напіврідкого агару). Торкатися руками країв канюлі, голки і країв пробірок не можна. Ватно-марлеву пробку покладається тримати на вазі за її зовнішню частину. p> СМЖ досліджують негайно при доставці в лабораторію. Стерильною пастерівської піпеткою з дна пробірки беруть 0,3 - 0,5 мл матеріалу і по 2 - 3 краплі засівають на поверхню 2-х чашок Петрі з підігрітою живильним середовищем, розтираючи шпателем. Одна чашка містить "шоколадний" агар, друга - сироватковий. Посіви ставлять у термостат при +37 0 С і створюють умови підвищеного вмісту СО 2 в атмосфері термостата. Пробірка з ликвором в напіврідкому агарі інкубується в термостаті.
Нативна спинномозкова рідина, що залишилася в пробірці, досліджується в серологічних реакціях і використовується для приготування мазків.
Ставлення до фарбування за Грамом у нейсерій виражено недостатньо чітко, тому вони забарвлюються метиленовим синім або за Грамом в модифікації Калини. Пряма мікроскопія забарвлених мазків спинномозкової рідини в відомої частини випадків дозволяє встановити наявність бактерій, що викликають гнійний менінгіт.
H.influenzae видна в вигляді дрібних поліморфних грамнегативних паличок і ниток, оточених ледве помітною ніжною капсулою.
Пневмококи мають вигляд ланцетовідних диплококів і коротких ланцюжків, утворюють капсулу. Вони грамположительни, добре фарбуються всіма аніліновими барвниками, при цьому капсула залишається неокрашенной і помітна тільки на забарвленому фоні.
Результати бактеріоскопії негайно повідомляють лікаря у вигляді попереднього відповіді. При достатній кількості досліджуваного матеріалу рекомендується 2 - +3 краплі засіяти в чашку з живильним середовищем для визначення чутливості до антибіотиків.
2-й день дослідження
Незалежно від результатів бактеріоскопії ліквору переглядають засіяні чашки. Перегляд чашок ведуть візуально і за допомогою бінокулярного стереоскопічного мікроскопа, лупи МБС. До уваги беруть всі колонії. Чашки з відсутністю зростання інкубують одну добу. Готують препарати-мазки, забарвлюють, ставлять реакцію з 3% розчином КОН та біохімічні тести - на оксидазу, каталазу, уреазу. Гемофілія притаманний різкий специфічний запах від посівів.
Морфологія менингококкових колоній "шоколадному" агарі - ніжні, сіруватого кольору, з блискучою поверхнею і рівними краями, мають маслянисту консистенцію, розмірами от 0,1 до 3,0 мм. Менінгококи не міняють кольору середовища життє. На підставі мікроскопії мазків з колоній і результатів первинних біологічних тестів можлива видача попереднього відповіді. Якщо в мазках виявлені грамнегативні коки, це дає право віднести їх до роду нейсерій і провести диференціацію видів.
гемофілії на "Шоколадному" агарі дають рясний ріст. Колонії сірого кольору, плоскі діаметром 0,2 - 2,0 мм, легко знімаються з середи. У мазках, пофарбованих за Грамом, видно дрібні короткі грамнегативні палички з капсулою різної ступеня вираженості, а також нитки різної довжини і короткі ланцюжки. На сироватковому агарі H.influenzae не росте. Великі 3 - 5 мм колонії, містять грамнегативні палички, підозрілі н...
