а ентеробактерії. Candida та P.aeruginosa ростуть рясно на всіх середовищах, не змінюючи кольору "Шоколадного" агару. p> Колонії пневмококів на обох середовищах - дрібні (0,1 - 1,0 мм), іноді плоскі, з вдавлення в центрі. На "Шоколадному" агарі вони оточені зоною жовто-зеленого гемолізу (тип О±-гемолізу). За зовнішнім виглядом колонії пневмококів на обох середовищах важко відрізнити від колоній стрептококів групи В, зеленящіх стрептококів, ентерококів (S.feacalis), які в окремих випадках можуть викликати менінгіт, особливо у дітей 1 року.
У мазках з колоній пневмококи мають овальну або кулясту форму, розташовуються парами або в вигляді коротких ланцюжків з 2 - 3 пар. Якщо є рясний ріст однакових колоній, то допустимо одномоментний відсів на диференційно-діагностичні середовища, вивчення культури за низкою ознак і антібіотікочувствітельності. Визначення чутливості ентеробактерій і стафілококів проводять на середовищі АГВ. Це середовище є основою для визначення чутливості до антибіотиків менінгококів при додаванні 20% сироватки. H.influenzae і пневмококів - при додаванні відповідної кількості крові. Приготування поживних середовищ і постановка тесту на антибіотикочутливість проводиться відповідно до діючими вказівками.
На цьому етапі можлива видача остаточної відповіді, при позитивній реакції із специфічними антисироватками для H.influenzae, N.meningitidis і Str. pneumoniae.
Колонії, підозрілі на менінгококи, відсівають на скошений сироватковий агар або сектор чашки і інкубують при +37 0 С.
Колонії, підозрілі на пневмококи, стрептококи та ін відсівають на 2 сектори кров'яного агару (з 5% крові) для подальшого визначення чутливості до жовчі і постановки тестів на лікарську чутливість.
Якщо число вирослих колоній мало (1 - 2), то їх відсівають на чашку з сироватковим або "Шоколадним" агаром для накопичення мікробної маси, а ідентифікацію мікроба проводять ще через одну добу.
При менінгітах новонароджених та дітей раннього віку, в також зрідка в інших вікових групах, крім трьох перерахованих видів мікроорганізмів етіологічними факторами можуть бути ентеробактерії (E.coli, S.marcescens, K.pneumoniae, Salmonella, Citrobacter, Enterobacter), синьогнійна паличка (P.aeruginosa), Acinetobacter calcoaceticum, Listeria monocytogenes, різні стрептококи - гемолітичні групи В, "зеленящего" і ентерококи, а також стафілококи (золотистий і епідермальний) і гриби роду Candida.
При підозрі на ентеробактерії, синьогнійну паличку, стафілокок і Ac.calcoaceticum проводять дослідження відповідно з методичними матеріалами.
При підозрі на лістерії в цей день, якщо число колоній дозволяє, ставлять ряд проб, а також тест на чутливість до антибіотиків. Для L.monocytogenes характерно: рухливість при кімнатній температурі, розкладання мальтози, глюкози, инактивность стосовно дульціту, маніт, сорбіту та арабінози. Сахароза та гліцерин розкладаються повільно. L.monocytogenes утворює крайову зону гемолізу на агарі з 5% баранячої крові, розлитому шаром 3 мм.
Для ідентифікації Candida albicans роблять посів з підозрілих білих випуклих колоній, складаються з дріжджових клітин, на середу Сабуро або м'ясо-пептони агар, містить по 100 МО/мл пеніциліну і стрептоміцину.
Якщо прямий посів на чашки з живильним середовищем не дав росту колоній, то робиться висів на чашки з сироватковим, "шоколадним" агаром з инкубировались в термостаті суміші ліквору з напіврідким агаром (середовище "збагачення").
При негативних результати висів з середи "збагачення" повторюють через 1 - 2 дні на протягом 5 днів інкубації в термостаті.
При отриманні зростання колоній дослідження їх проводять тим же шляхом, що і при прямому посіві спинномозкової рідини.
3-й день дослідження
Культури, відсіяні з окремих колоній, переглядають під МБС і ставлять пробу з 3% розчином КОН.
Для оцінки чистоти виросла культури готують мазки і переглядають. При виявленні морфологічно типових грамнегативних коків, проводять ідентифікацію, серогруппірованіе ідентифікаційної культури, а також використовують цю культуру для визначення лікарської стійкості (якщо ці тести не були зроблені на 2-й день).
Враховують результати посівів, зроблених на 2-й день дослідження. На цьому етапі можлива видача остаточного позитивної відповіді для менінгококів та ін мікроорганізмів (Крім пневмококів і стрептококів). p> Для диференціації пневмококів, зеленящіх і фекальних стрептококів (ентерококів) по мікроскопії чистих культур на секторах кров'яного агару враховують характер гемолізу навколо вирослих колоній і ставлять додаткові проби.
На один з двох секторів кров'яного агару з ростом колоній накладають диск з фільтрувального паперу, просоченої 20% розчином жовчі (на фізіологічному розчині), після чого чашку поміщають при +37 0 С на 1 - 2 години. Після закінчення цього часу навколо диска колонії пневмококів лизир...
