вості кілька місяців. [3, 4] В
1.4.4 Техніка нанесення досліджуваних розчинів
Як виявляється, нанесення досліджуваної речовини не така складна операція, але разом з тим, вона дуже впливає на отримувані результати хроматографування.
Часто, дослідженню піддаються або рідкі аналізовані речовини, або розчини твердих речовин, без будь-якої попередньої пробопідготовки.
Тому необхідно завжди пам'ятати ряд моментів, серйозно впливають на результати поділу.
Найбільш важливим є концентрація наносяться речовин. У ТШХ прийнято наносити концентрації розчинів близько 1%. Але з іншого боку чутливість методу дозволяє визначати речовини з набагато меншими концентраціями.
Якщо в досліджуваному речовині невідома загальна концентрація компонентів, або відома концентрація, але такого типу речовини ще хроматографіровалі, потрібно визначити яке кількість досліджуваного розчину достатньо для якісної хроматографії. Існують кілька прийомів, що дозволяють це визначити. p> Для початку потрібно нанести декілька плям хроматографіруемого розчинів, рівні за розміром, але з різним кількістю (наприклад 1, 2, 5 мкл) і після хроматографування вивчити форму і розміри розділених плям.
Так при правильно підібраної концентрації форма розділених речовин така ж, як і форма нанесеною на лінії старту. Якщо розділені плями мають великі розміри, ніж пляма на старті, то нанесена концентрація занадто велика. Поява "Хвостів", неправильна форма розділених плям на платівці теж може говорити про високу концентрацію, але може бути викликана неправильно підібраною хроматографічної системою, або хімічною взаємодією поділюваних компонентів. Підбором кількості нанесеного речовини і системи розчинників можна домогтися повного поділу на одній платівці до десяти компонентів у досліджуваних речовинах. Зручно наносити зразки на спеціальному столику з трафаретами і підігрівом. Нанесення плям проводять на "лінії старту "1-2 см від нижнього краю пластинки. Це необхідно для того, щоб при опусканні пластинки в систему не відбувалося розчинення в ній зразків, а всі нанесене речовина піддалося хроматографування.
Нанесення розчинів проводять або мікрошприцем, або відградуювати капілярами. Розмір завдається плями не повинен перевищувати 4 мм. Це пов'язано з тим, що при більшому розмірі плями, відбувається зміна форми під дією фізичних сил, та й кордону розділених компонентів можуть перекриватися.
Нанесення на пластини досліджуваних речовин не повинні супроводжуватися руйнуванням сорбенту (що досить сильно впливає на якість розділення), тому крапля повинна наноситися дотиком голки або капіляра про шар сорбенту, а не натисканням. На розмір утворюється плями впливає не тільки кількості наносимого розчину, але і від полярності розчинника і його температури кипіння. Так при нанесенні одного і того ж речовини в різних розчинниках, що утворилося пляма в якому в якості розчинника використовувався метанол буде більше, ніж ...
