an> і 12,3 мл 0,1 М КОН; span>
. Для приготування розчину 0,1 М КН 2 РВ 4, розчинили 0,24 г солі в 17,7 мл води;
. Для отримання розчину 0,1 М КОН розчинили 0,07 г лугу в 12,3 мл води;
. Для отримання 0,9%-ого розчину NaCl, розчинили 0,9 г солі водою в мірній колбі на 100мл;
. Для отримання 0,8% - ого розчину MgS0 4, розчинили 0,2 г солі водою в мірній колбі на 25 мл;
. Для приготування 3%-ого розчину крохмалю, 3г крохмалю змішували з 10мл холодної води, отримавши насичену кашку, яку влили в 87мл гарячої води, трохи прокип'ятили і охолодили;
. Для отримання 0,1 М розчину NaF, 0,1 г солі розчинили в мірній колбі на 25мл;
. Для отримання 10% ТХУ, розчинили 10г кристалічної трихлороцтової кислоти в мірній колбі на 100мл;
Хід аналізу
В дослідну пробірку налили 1мл 3%-го розчину крохмалю, 2мл реактиву А, 1мл 0,1 М розчину фтористого натрію і 1мл витяжки досліджуваного об'єкта, витримали протягом 2 год при температурі 37 В° С, перемішали потім у пробірку прилив 5мл 10%-го розчину Тху, перемішали і довели вміст пробірки водою до обсягу 10мл, потім осад відокремили на центрифузі. Далі визначали фосфор за методом Лоурі і Лопесу в модифікації Скулачова.
Паралельно проводили контрольне визначення, додаючи реактив А і фтористий натрій до прокип'яченими ферменту або після попереднього припинення дії ферменту 10%-м розчином Тху (1мл ферменту + 5мл 10%-го розчину Тху).
Активність фосфорилази виражали в міліграмах пов'язаного фосфору під дією ферменту з 100г тканини. Кількість зв'язаного фосфору визначали за різницею між вмістом фосфору в контрольній (неорганічний фосфор) і дослідної пробах (загальний фосфор). br/>
.2.3 Визначення зміст фітину мокрим озоленням
В дослідну пробірку налили 2мл реактиву А, 1мл 0,1 М розчину фтористого натрію і 1мл досліджуваної витяжки, яку попередньо прокип'ятили або можна додати 5мл 10%-ого розчину Тху, а потім 1мл витяжки. Фосфор фітину після озолення визначали колориметричним методом за Лоурі і Лопесу в модифікації Скулачова, як описано вище.
Кількість знайденого фосфору (у Р 2