літинну мембрану, - одна з якостей, яке повинно бути присутнім у ефективного антисмислового олігонуклеотиду. Більшість описаних вище модифікацій нуклеотидів у складі ODN не роблять значного впливу на транспорт ODN через клітинну мембрану. Існує кілька шляхів проникнення молекул через плазмалемму, але для ODN важливі два: дифузний, або рецептор-опосередкований, і рецептор-опосередкований. Транспорт по першому варіанту утруднюється сумарним негативним зарядом ODN та їх гідрофільністю. Використання другого шляху обмежена недостатніми даними про поверхневих білках мембрани клітин, що відповідають за транспорт нуклеїнових кислот в клітку. Створення кон'югатів ODN з різними хімічними групами сприяє підвищенню ефективності транспорту з того чи іншого шляху в залежності від типу хімічної групи та місця її приєднання до ODN. На малюнку 9 представлені варіанти лінкерів, які використовуються при отриманні кон'югатів. Ліганди можна приєднувати до азотистим підстав, кінцевим фосфатах, фосфодіефірнимі (або аналогічним їм) зв'язках, а також залишкам цукру. Деякі типи хімічних груп дозволяють також візуалізувати компартментализацию шляхом детекції флуоресценції. br/>В
Рис.9. Приклади лінкерів для приєднання лігандів. p align="justify"> Часткова і навіть повна нейтралізація негативного заряду ODN не робить істотного ефекту на здатність ODN до мимовільного транспорту в клітку. Приєднання різних об'ємних гідрофобних лігандів, зокрема, тих, що зображені на малюнку 9, полегшує транспорт ODN через мембрану. br/>В
Рис.10. Приклади ліпофільних лігандів. br/>
Добре вивчені кон'югати з холестеролом [3,4,24,25]. Механізм, який поліпшує проникнення в клітину за рахунок приєднання холестеролу, ще не до кінця зрозумілий, хоча, передбачається рецептор-опосередкований включення ліпопротеїдів [25]. Холестеролових кон'югати утворюють міцели, що полегшує їх транспорт всередину клітини. Приєднують залишок холестеролу зазвичай по кінцевим 5 - і 3 -фосфатах, причому 3 -монохолестерилолигонуклеотиды більш ефективні в порівнянні з 5 -монохолестерилолигонуклеотиды, а самими дієвими є 5 , 3 -бисхолестерилолигонуклеотиды. Наприклад, через 6 хв після ін'єкції в кров миші рівень в тканинах 3 -мономодіфіцірованних фосфоротіоатіов був в 4 рази, а 5 - моно-і 3 , 5 -бісмодіфіцірованних - в 7 разів вище в порівнянні з немодифікованими фосфоротіоатамі [27].
Використовують мономери з 5 - або/і 3 -холестерілзамещенним фосфатом [2,24], олігонуклеотиди з лігандом, кон'югованим з фосфодіефірних зв'язком перед 3...
