нянні з 5-монохолестерилолигонуклеотиды, а самими дієвими є 5,3-бисхолестерилолигонуклеотиды. Наприклад, через 6 хв після ін'єкції в кров миші рівень в тканинах 3-мономодіфіцірованних фосфоротіоатіов був в 4 рази, а 5-моно-і 3,5-бісмодіфіцірованних - в 7 разів вище в порівнянні з немодифікованими фосфоротіоатамі [27].
Використовують мономери з 5 - або/і 3-холестерілзамещенним фосфатом [2,24], олігонуклеотиди з лігандом, кон'югованим з фосфодіефірних зв'язком перед 3-кінцевим нуклеозидом [25], а також холестеріловие Дендримери із залишком лізину в якості линкера (см . рис. 11) [23]. <В
Рис.11. Нерозгалужені і розгалужені кон'югати з холестеролом. br/>
Олігонуклеотиди, кон'юговані з іншими гідрофобними молекулами (адамантан, пірен, ейкозановая кислота тощо), були синтезовані і порівняні з холестеролових. Холестеролових кон'югати показали оптимальну липофильность, а також хорошу здатність до акумуляції в печінці [24]. p> Кон'югація з похідними пірену, крім поліпшення здатності до транспорту, становить інтерес з причини їх здатності до флюоресценції. Біс-піренільние похідні здатні утворювати Ексімер - бімолекулярні комплекси, в яких одна молекула знаходиться в основному стані, інша - в збудженим. Такі комплекси дуже чутливі до просторового оточенню, за рівнем флуоресценції можна судити про те, знаходиться ODN у зв'язаному з РНК-мішенню стані чи ні [29-32]:
В
Рис.12. Ексимерні флюоресценція біспіренільних кон'югатів ..
Для поліпшення ефективності транспорту в клітку використовуються також пептидні кон'юганти. До олігонуклеотидів, в т.ч. PNA, приєднують пептид, здатний переносити через мембрану великі полярні заряджені молекули [3]. Так, пептид Antennapedia має сайти зв'язування ДНК. PNA з приєднаним пептидом Antennapedia не тільки ефективно проникає в клітину, а й мігрує в ядро ​​[20]. br/>В
Рис.13. Пептидний кон'югат. br/>
Приєднання до кінців молекул антисмислових ODN великих плоских інтеркалірующіх молекул, таких, як акридин (див. рис. 14), становить інтерес в якості побільшувача ефективності розщеплення молекули РНК-мішені. За рахунок інтеркаляції локально розпушується взаємодія ODN - РНК. У наслідок збільшення відстані між ДНК і РНК за рахунок розмірів молекули інтеркалятора утворюється В«випетліваніеВ» молекули РНК з подвійної спіралі гетеродуплекса. Катіони важких металів, наприклад Lu3 +, координовані з атомами азоту залишку акридину, каталізують гідроліз РНК без участі РНКази H, а В«випетліваніеВ» як дестабілізуюча структура прискорює цей процес [39]. br/>В
Рис. 14. Кон'югат з інтеркалірующім агентом. br/>
1.3 Фізико-хімічні аспекти взаємодії олігонуклеотиду і РНК-мішені
Ефективність дії антисмислових олигонуклеотидов кількісно характеризується спорідненістю ODN до мРНК-мішені і ефективної константою розщеплення останньої. p align="justify"> Спорідненіст...
