ваного розчину;
?- Питомий показник поглинання речовини;
l - товщина поглинаючого шару, в сантиметрах.
У ряді випадків навіть при використанні монохроматичного випромінювання можуть спостерігатися відхилення від закону Бугера-Ламберта-Бера, зумовлені процесами дисоціації, асоціації та комплексоутворення. Тому попередньо слід перевірити лінійність залежності оптичної щільності розчину від концентрації в аналітичній області. При наявності відхилень від лінійної залежності слід користуватися не формулою закону Бугера-Ламберта-Бера, а експериментально знайденої залежністю (калібрувальним графіком).
Згідно ГФ США калібрувальний графік рекомендується використовувати тільки за наявності постійних вимірювань підтверджують його достовірність. Крім того перевірка проводиться при надходженні нових серій реагентів. [5]
Спочатку вимірюють оптичну щільність розчину стандартного зразка, приготованого, як зазначено у приватній фармакопейної статті, потім проводять вимірювання оптичної щільності випробуваного розчину. Другий вимір проводять відразу після першого, з використанням тієї ж кювети, в тих же експериментальних умовах.
Метод з використанням стандартного зразка є більш точним і надійним. Можливість застосування значення питомого показника поглинання в кожному конкретному випадку слід обгрунтовувати. Зазвичай метод з використанням значення питомого показника поглинання застосуємо при допусках змісту аналізованого речовини не менш + / - 10% від номінального змісту. [1]
Багатокомпонентний спектрофотометрический аналіз
Багатокомпонентний спектрофотометрический аналіз (аналіз сумішей) застосовують для одночасного кількісного визначення декількох компонентів лікарських засобів, кожне з яких підпорядковується закону Бугера-Ламберта-Бера.
Кількісне визначення в багатокомпонентному спектрофотометричному аналізі грунтується зазвичай на використанні рівняння:
де:
А - оптична щільність досліджуваного розчину при i-ой довжині хвилі;
- показники поглинання (залежні від способу вираження
концентрації) j-го компонента зразка при i-ой аналітичної довжині хвилі; - концентрація j-го компонента зразка.
Відповідні методики проведення аналізу та розрахункові формули вказуються в приватних фармакопейних статтях. [1]
Таким способом проводять кількісне визначення фуразолидона при довжині хвилі 367 нм, згідно ГФ Х11 і фуродоніна при лине хвилі 360 нм згідно ГФ Х
Похідна спектрофотометрія
Похідна спектрофотометрія може бути використана як для цілей ідентифікації речовин, так і їх кількісного визначення в багатокомпонентних сумішах, а також у тих випадках, коли є фонове поглинання, викликане присутністю речовин, вміст яких не регламентується.
Спектр першої похідної являє собою графік залежності градієнта кривої поглинання (швидкість зміни оптичної щільності з довжиною хвилі,) від довжини хвилі.
Спектр другої похідної являє собою графік залежності кривизни спектра поглинання (d А 2 /? 2) від довжини хвилі. Друга похідна при будь-якій довжині хвилі пов'язана з концентрацією таким співвідношенням:
де: - оптична щільність при довжині хвилі лямбда;
