кісному визначенні речовини.
Є винятки при яких не можливо використовувати цю величину, такі случи виникають при сильній асоціації молекул в розчині з молекулами розчинника і іонізації. Це призводить до відхилення від закону Бугера-Ламберта-Бера. У таких випадках користуються калібрувальним графіком.
Ця величина являє собою питомий показник поглинання, тобто оптичну щільність розчину речовини з концентрацією 10 р. / л (1 г/100 мл) в кюветі з товщиною шару 1 см. Існує також молярний коефіцієнт поглинання, який відрізняється від перших двох випадків тим, що концентрація виражена в моль л. Ці величини є експериментально отриманими, шляхом приготування стандартних розчинів. Для приготування стандартних розчинів застосовуються розчинники, що відповідають вищезазначеним вимогам. Особливо важливо звернути увагу, при приготуванні стандартного розчину, на те, що субстанція може міститися вода, тому береться навішування висушеного речовини. Якщо речовина термолабільного (при нагріванні руйнується). Робиться перерахунок з урахуванням навішування. [5]
Вибір товщини шару і концентрації розчину
Як було зазначено вище згідно закону Бугера-Ламберта-Бера, поглинання залежить від таких величин, як товщина шару, концентрація і молярний коефіцієнт поглинання.
Розрахунки показують, що мінімальні помилки виникають при оптичної щільності рівний 0.44. На практиці отримують хороші значення при оптичної щільності від 0.2 до 0.8.
Для розрахунку «аналітичної» концентрації і товщини кювети виходять з того що оптична щільність повинна бути в межах від 0.2 до 1, наприклад, 0.5
Використовують формулу, прирівнюючи товщину кювети до 1 см, при розрахунку аналітичної концентрації:
,
де D-оптична щільність,? коефіцієнт поглинання
Аналогічним чином можна підбирати товщину кювети, виходячи з відомої концентрації. Це особливо значимо в тих випадках, коли розчинність обмежена.
Встановлення достовірності
Абсорбційну спектрофотометрію у видимій області спектра застосовують для визначення автентичності лікарських засобів шляхом порівняння спектрів поглинання випробуваного розчину і розчину стандартного зразка. У зазначеній області спектра повинно спостерігатися збіг положень максимумів, мінімумів, плечей і точок перегину, обумовлених у приватних фармакопейних статтях. Розбіжність між що спостерігаються і вказаними довжинами хвиль в максимумах і мінімумах поглинання не повинно зазвичай перевищувати + / - 2 нм від позначених в частій статті. [1]
Можливі й інші варіанти застосування, обумовлені в приватних фармакопейних статтях.
Теоретичні аспекти поглинання певної довжини хвилі були розглянуті нижче.
Наприклад в ГФ Х11 таким методом встановлюється справжність фуразолидона. Так згідно ФС в ГФ Х11, в області від 230 до 400 нм повинні збігатися всі максимуми і мінімуми розчину субстанції з максимумами і мінімумами стандартного зразка. [1]
Кількісне визначення
Відповідно до державної фармакопеї як одинадцятий, так і дванадцятим визначення концентрації речовин спектрофотометричним методом засновано на використанні закону Бугера-Ламберта-Бера у формі:
де: - концентрація речовини в г/100 мл; - оптична щільність досліджу...
