с розмножується з характерними цитопатичної змінами: появою окремих округлих рефрактільних клітин, які поступово відриваються від скла. p align="justify"> У міру розвитку інфекції число клітин, які зазнали дегенерації, збільшується і утворюються великі порожнечі в монослое. По краях збереглися острівців уражені клітини концентруються, утворюючи великі конгломерати, що нагадують грона винограду. p align="justify"> Специфічність цитопатичних змін підтверджується в реакції нейтралізації.
У культурі клітин після зараження через 20-30 год утворюються характерні внутрішньоядерні включення, які добре виявляються при фарбуванні препаратів або методом флуоресцентних антитіл. [6]
.6.1 Реакція преципітації в гелі
Для діагностики інфекційного гепатиту широко використовують реакцію преципітації в агарових гелі. Простота постановки реакції, її висока чутливість і сувора специфічність дозволяють поставити діагноз протягом 24-48 год, а також встановити антигенну спорідненість різних штамів. p align="justify"> Реакція може бути застосована для лабораторної діагностики у випадках остропротекающая захворювання, оскільки преципітує антиген виявляється у хворих тварин на 2-3-й день після зараження в різних органах і тканинах, а також для виявлення перенесеного раніше процесу, тому що антитіла у перехворіли собак можуть зберігатися кілька років. Для постановки реакції преципітації вимагаються наступні компоненти: тестирующая система, що складається з антигену вірусу інфекційного гепатиту собак, специфічної гіперімунної сироватки проти вірусного гепатиту, контрольного позитивного антигену, контрольного негативного антигену. Механізм реакції в гелі полягає в наступному: що знаходяться роздільно в гелі антигени і антитіла дифундують один до одного, і на місці їх зіткнення (зустрічі) утворюється смужка преципітату, що вказує на позитивний результат. В якості випробуваного антигену використовують 10%-ву суспензію печінки хворих тварин. Специфічну гипериммунную сироватку отримують шляхом імунізації собак або використовують імунну сироватку реконвалесцентів. Реакція проходить при температурі 37 В° С протягом 48-72 ч. Сироватку в лунки агару додають дрібно, через кожні 12 ч. Реакція вважається позитивною, якщо між випробуваним антигеном і гіперімунною сироваткою в агарі з'являється смужка молочного кольору, за інтенсивністю виявлення рівна завідомо відомому антигену і гіперімунною контрольної сироватці. Між нормальною сироваткою і антигеном смужок не повинно бути. Нечітко виражені (розпливчасті) смужки преципітату розцінюються як сумнівна реакція, а утворення зон навколо лунок є неспецифічної реакцією. [6]
.6.2 імунолюмінесценції
Цим методом, застосовуючи непрямий метод люмінесцирующих антитіл, можна виявити специфічний антиген в зрізах, мазках, відбитках, в зараженій культурі тканини. З цією метою на фіксований в охолодж...
