.
Перші два розведення не використовують для посіву, а четверте і п'яте ми використовували для посіву на середовища МПА (м'ясо-пептони агар) і СА (сусло-агар) методом поживних пластин (метод Коха). Для глибинного посіву ми взяли 1 мл грунтової суспензії, внесли в стерильну чашку Петрі, залили агаром, розплавленим і охолодженим до 45, і перемішали круговими рухами.
.3 Метод обростання грудочок грунту
Якщо чисельність будь-яких груп мікроорганізмів у грунті невелика, то виявити їх чисельність можна методом обростання грудочок. Для цього ми використовували середовища Гетчинсона і Ешбі. Ми взяли грунт з зразка та розклали його грудочками по всій поверхні поживних середовищ і прибрали в термостат з температурою 26.
Кожен посів проводиться в дворазової повторності.
5. Облік мікроорганізмів на щільних середовищах
.1 Якісна і кількісна оцінка мікроорганізмів на МПА
На МПА виявляють мікроорганізми, використовують органічні форми азоту - амоніфікаторів.
Після інкубації ми вийняли чашки з засіяними середовищами з термостата і підрахували число колоній, які відображають число живих клітин мікроорганізмів у грунті. Після підрахунку кількості всіх колоній на чашці ми їх згрупували по культуральним ознаками: характером росту на агарі, кольором, краю, формою, розміром (приблизний) і консистенції колонії - для якісного аналізу сапротрофного мікрофлори на МПА. Ми вибрали четверте розведення, бо колонії на середовищі були виділені більш чітко і не перекривалися один одним.
Табл. 3
Кількісна оцінка мікроорганізмів на МПА
Хіба-деніеОбщее КУО (СР з 2х повторнос-тей) в чашкеКолічество мікроорганіз-мов КУО/1 г абсолютно сухої почвиЧісло домінуючих КУО (СР з 2х повторностей) Домінуючі форми КУО/1 г абсолютно сухої почвиДомінірующая форма і її зміст (%) 10-479 64? 104 48 39? 104 60,8%
Кількість мікроорганізмів в 1 г абсолютно сухого грунту:
79? 104/0,81=64? 104
Кількість мікроорганізмів домінуючої форми в 1 г абсолютно сухого ґрунту:
48? 104/0,81=39? 104
Частка домінуючих форм у загальній чисельності мікроорганізмів:
64? 104/39? 104? 100%=60,8%
Табл. 4
Культуральні та морфологічні ознаки домінуючих мікроорганізмів
Культуральні прізнакіМорфологіческіе прізнакіПредполагаемий рід, до якого можна віднести описуваний мікроорганізмФорма колонії: округла; колір: кремовий; блиск: матовий; поверхню: гладка; край: рівний; структура: однорідна; консистенція: щільна. Рис. 1.бактеріі роду Bacillus під мікроскопом,? 1600 Форма клітини: паличкоподібна; Характер розташування клітин: поодинці; Здатність до спороутворення: спорообразующіер. Bacillus
Якісна і кількісна оцінка мікроорганізмів на СА
Середу сусло-агар застосовують для обліку мікроскопічних грибів. Облік проводять аналогічно попередньому.
У нашому зразку були виявлені гриби роду Penicillium і Aspergillus, але Aspergillus за чисельністю переважав.
Табл. 5
Кількісна оцінка мікроорганізмів на СА
Хіба-деніеОбщее КУО (СР з 2х повторнос-тей) Кількість мікроорганіз-мов КУО на 1 г абсолютно сухої почвиЧісло домінуючих КУО (СР з 2х повторностей) Домінуючі форми КУО на 1 г абсолютно сухої почвиДоля домінуючих форм і їх процентне содержаніе10-316 13? 103 14 11,3? 103 87,5%
Кількість мікроорганізмів в 1 г абсолютно сухого грунту:
16? 103/0,81=13? 103
Кількість мікроорганізмів домінуючої форми в 1 г абсолютно сухого ґрунту:
14? 10 березня/0,81=11,3? 103
Частка домінуючих форм у загальній чисельності мікроорганізмів:
13? 103/11,3? 103? 100%=87,5%
Рис. 2 середу СА, розведення витяжки 10-2 Рис. 3 середа СА, розведення витяжки 10-3
Табл. 6
Культуральні та морфологічні ознаки домінуючих мікроорганізмів.
Культуральні прізнакіМорфологіческіе прізнакіПредполагаемий рід, до якого можна віднести описуваний мікроорганізмФорма колонії: округла; розмір: 6 мм - 8 см; колір чорний; блиск: відсутня; поверхню: бархатиста; край: зубчастий; структура: однорідна. Рис. 4 гриб роду Aspergillus,? 64 Виявлено міцелій і спорир. Aspergillus
6. Облік кількості мікроорганізмів методом обростання грудочок грунту
Цей метод використовується д...
