ряд розчинів, що застосовуються для просвітлення кератину рогових лусочок і волосся: лактофенол (20 г 85% молочної кислоти, 40 г гліцерину, 20 мл дистильованої води, 20 г кристалічної карболової кислоти і 0,05 г бавовняної синьки), хлорлактофенол (20 г кристалічного хлоралгідрату, 10 г кристалічної карболової кислоти, 10 г молочної кислоти), 10% водно-спиртовий розчин сульфіду натрію, 15% КОН в 15% диметилсульфоксиде на дистильованої воді. Оптимальними і приблизно рівноцінними розчинами, просвітлюють шкірні та нігтьові лусочки, є 10% КОН, 15% КОН +15% ДМСО і 10% Na2S.
Для обробки грубих рогових мас нігтів, лусочок шкіри з підошов і долонь і при масових оглядах застосовують методи збагачення. Матеріал у центрифужних пробірках заливають 1,5-2 мл 20% КОН, кип'ятять у водяній бані 30-60 хв, потім центрифугують 15 хв при 3000 об/хв або відстоюють 1 добу. Після зливання рідини осад переносять на предметне скло пастерівської піпеткою і мікроскопіруют.
Нігтьові лусочки рекомендується обробляти PAS (periodic acid-Shiff) методом, який забарвлює гіфи грибів в червоний колір.
Характер ураження волосся дерматофітами дозволяє визначити родову приналежність гриба. Вид можна визначте тільки з культури. p> Існують такі типи ураження волосся дерматофітами:
I. Trichophyton ectotrix - артроспори розташовуються неправильними ланцюжками зовні волоса, оточуючи його в основі. Уражені волосся не флюоресцируют. Tr. ectotrix має дві різновиди: Тг. ectotrix megasporon (Крупноспоровий, розмір спор 8-12 мк), характерний для ураження Т. equinum, T. gallinae, Т. megninii, Т. rubrum, Т. verrucosum і Tr. ectotrix microides (мелкоспоровий, розмір суперечка 3-5 мк), характерний для ураження Т. mentagrophytes.
2. Trichophyton endotrix - артроспори розміром 3-5 мк паралельними ланцюжками розташовуються тільки всередині волосся. Уражені волосся не флюоресцируют: вони скручуються і ламаються, залишаючи короткі пеньки або В«чорні точкиВ». Даний тип поразки характерний для Т. tonsurans, T. violaceum, а також для африканських дерматофітів Т. gourvilii, T. soudanense, T. yaoundei.
3. Microsporum - артроспори розміром 2-3 мк (нечітко видно при малому збільшенні) безладно-мозаїчно розташовуються усередині волосся і белесоватим чохлом оточують його стрижень зовні. Уражені волосся яскраво флюоресцируют; обламуючи, вони залишають пеньки 5-8 мм. Такий тип ураження волосся характерний для М. audouinii, M. canis, M. distortum, M. ferrugineum. При натисканні на покривне скло в препараті з ураженого мікроспорумамі волоса іноді можна бачити міцеліальних бахромку - так звану В«кисть Адамсона В». Волосся, уражені М. gypseum, M. fulvum, M. nanum, M. vanbreuseghemii, що не флюоресцируют, суперечки при цьому більші (5-8 мк) і видно при малому збільшенні.
4. Trichophyton - характерне для фавуса полиморфное поразка волосся септірованного гифами міцелію різної ширини і артроспори різної величини, розташованими всередині волосся, містять бульбашки повітря і крапельки жиру. Волосся не заповнені грибковими елементами, залишаються довгими; слабо флюоресцируют під лампою Вуда. Однак не слід засновувати діагноз тільки на наявності в волосі бульбашок повітря і крапель жиру, так як вони іноді спостерігаються і при інших типах ураження. Крім ураження волосся за типом Achorion, для фавуса характерно освіта скутул, - жовтих кірочок, містять гіфи й суперечки гриба. Даний тип ураження викликають Т. schoenleinii, Т. violaceum, M. gypseum.
У лусочках гладкої шкіри, ураженої дерматофітами, можна бачити гіфи септірованного гіллястого міцелію шириною 2-4 мк, іноді ланцюжки з округлих або многокутних артроспор розміром 4-7 мк. У нігтьових лусочках частіше спостерігають ланцюжка або скупчення артроспор і рідше гіфи міцелію.
Слід відрізняти від елементів гриба такі артефакти, що виникають в препаратах, як так званий В«мозаїчний грибВ» (розташовується по межах епітеліальних клітин, складається з фрагментів органічної природи різного розміру), подовжені кристали лугу (полігональних форма); зникають при промиванні препарату, для чого з одного боку наносять краплю води, а з іншого поміщають шматочок фільтрувального паперу і обережно, щоб не втратити матеріал, повторюють 2-3 рази, краплі жиру (різні розміри, відсутність внутрішньої структури), нитки вати (розмір, гомогенність, неправильна форма, пензлик на кінці).
У ув'язненні за мікроскопії патологічного матеріалу вказують тип поразки волосся, наявність або відсутність міцелію і спор гриба в шкірних і нігтьових лусочках. Проте вважають, що гіфи дерматофітів в препаратах не відрізняються від міцелію дрож-жеподобних або цвілевих грибів. Тому для визначення виду збудника потрібно поєднувати мікроскопію патологічного матеріалу з отриманням чистої культури. При цьому зразки патологічного матеріалу слід культивувати і при негативних результатах мікроскопії.
III. Культуральне дослідження
