> Реакції дифузійної преципітації ставлять загальноприйнятими методами.
Макропреціпітація в агарі в чашках Петрі зводиться до наступного. Розплавлений агарових гель в кількості 25 мл наливають у чашки Петрі. У остигнула агарової пластині виштамповивают пробійником або скляною трубочкою отвори (діаметром 0,7 см), розташовуючи їх у формі шестикутників. Всі шість отворів розміщують на відстані 0,4 - 0,5 см один від одного і від центрального і дно кожного заливають краплею розплавленого агарового гелю. У периферичні лунки заливають антиген, в центральну-антитіла. Чашки поміщають у вологу камеру і залишають при кімнатній температурі або термостаті (37С) на 14-16 годин або 3-4 дні при кімнатній температурі. Облік реакції проводять через 24-48 годин і в наступні 2 дні. Реакцію оцінюють візуально, починаючи з контрольною. Якщо досліджувані антигени специфічні антитілам преципітує сироватки, то між центральною луночку і першими чотирма луночку утворюються смуги преципітації. [3]
Для мікропреципітації в агарі на предметних стеклах необхідні чисті, знежирені предметні скла. Їх поміщають горизонтально на стіл, злегка підігрітою піпеткою набирають потрібну кількість (3-5мл) розплавленого 1%-ного агарового гелю і виливають на поверхню скла. Агар застигає, утворюючи шар товщиною 1-1,5 мм. У агарі роблять луночки у вигляді трикутника, куди піпеткою заливають антигени і антисироватки. У центральну лунку наливають антисироватки, а в периферичні антигени. Після заповнення луночек компонентами скла поміщають у вологу камеру і залишають при кімнатній температурі. Перші результати досвіду можна реєструвати вже через 12 годин після постановки досвіду. Однак агарові платівки зазвичай витримують до двох тижнів. Для виключення можливості неспецифічної преципітації передбачають контролі нормальних антигенів і нормальних сироваток. При дифузії антигенів проти антисироваток в агарі утворюються обмежені зони, в яких антигени і антисироватки виявляються в оптимальних концентраціях. У цих зонах формуються лінії преципітації. [3]
Реакція імунофлуоресценції
Для дослідження (прямий метод) антивірусний гамма-глобулін кон'югують ізотіоціонатом флуоресцеїну. Дослідження проводять загальноприйнятим методом. Сутність і техніка прямого МФА полягає в тому, що на предметне скло з фіксованим на ньому мазком, або мазком-відбитком з віруссодержащего матеріалу наносять 2-3 краплі специфічної підозрюваному антигену (вірусу) флуоресціюючої імунної сироватки, або імуноглобуліну і поміщають в чашки Петрі з грудочкою вати, змоченим водою (волога камера) і витримують у термостаті протягом 30-40 хвилин при 36-37С, а потім промивають, висушують на повітрі і переглядають під імерсійною системою і люмінесцентному мікроскопі. Якщо антиген і антитіла специфічні, утворюється комплекс В«Аг + АтВ», який не змивається при промиванні мазка, і при мікроскопії препарату буде чі...
