итком шкірного оспенного поразки. На 5-6 добу на місці введення збудника формується набряклість з почервонінням, який у подальшому набуває темно-червоне забарвлення. За день до появи набряку шкіри у вівці підвищується температура тіла. Для отримання біомаси вірулентного вірусу на 6-7 добу, залежно від розвитку місцевого запалення і температури тіла, тварина вбивають, ділянка запаленої шкіри зрізують, яку очищають від механічних домішок, дезінфікують етиловим спиртом і піддають гомогенізації.
Модифіковані штами вірусу, призначені для приготування живих вакцин культивують в культурі первинних клітин, отриманих з нирковою та тестикулярной клітин ягнят, а штам В«КазНІВІВ» - у пересівати культурі клітин ТЯ-КК49 та лінії ПЗ. Для цього готують моношаровій культуру клітин відповідного виду, висіваючи клітини в концентрації 200-300 тис. на клітин/см 3 в матраци та 600-800 тис . клітин/см 3 - в кругові судини, заражають їх модифікованими вакцинними штамом вірусу в дозі 0,05 - 0,1 ТЦД 50/Кл , які потім культивують при температурі 37-38С протягом до розвитку ЦПД в 80% і більше площі моношару. ЦПД вірусу в таких культурах клітин проявляється на 3-4 добу, а на 6-7 добу вірусному поразці піддається максимальну кількість клітин моношару культури. У судинах з культурою клітин, у строки зараження вірусом і прояви ЦПД, замінюють живильне середовище підтримуючої. У момент максимального розвитку ЦПД, але без деструкції моношару культури клітин, судини із зараженою культурою клітин піддають заморожуванню. Культуральну суспензію після розморожування та визначення в ній титру вірусу використовують як вірусної маси для виготовлення вакцинного препарату. [2]
Деякі штами адаптувалися до ХАО розвивається курячого ембріона. Причому в результаті зникали патогенні і імуногенні властивості вірусу. Однак, за даними китайських дослідників, виділений ними польовий штам вірусу віспи овець навіть після 90 серійних пасажів на ХАО курячих ембріонів, втративши патогенність, зберігав імунізують властивості. [1]
Серологічні реакції для ідентифікації збудника віспи овець.
Реакція дифузійної преципітації
Метод заснований на утворенні в агарових гелі зон преципітації при взаємодії оспенного антигену зі специфічною сироваткою.
Для отримання сироватки, придатної ля використання в реакції дифузної преципітації, імунізують кроликів стодолу, роблять 2-4 внутрішньовенної ін'єкції (обсязі 2; 1; 0,5; і 0,25 мл) з інтервалом в 5 днів. Через 7 днів після останньої ін'єкції у кроликів беруть кров для отримання сироватки. Отримані кролячі сироватки необхідно виснажити культурою фібробластів ембріона вівці. [5]
