тепла при випаровуванні розчинника та ін
Великий інтерес представляють і інші поєднання мікроколоночной ВЕРХ з фізико-хімічними методами аналізу. Наприклад, показано, що з використанням дисків з броміду калію можна записати і запам'ятати хроматографическую інформацію, що надходить з микроколонки, і при необхідності отримати ІЧ-спектр та іншу інформацію про сюжеті піку або ділянці хроматограми.
ВЕРХ з градієнтом складу розчинника
При розробці методу розділення складних сумішей речовин, особливо біологічного та природного походження, Досліднику часто доводиться стикатися з тим, що в їх склад не тільки входить велика кількість з'єднань, але і сильно розрізняються їх властивості. Підібрати в цьому випадку сорбент і розчинник, які забезпечували б поділ вcex або більшості цікавлять дослідника компонентів, зазвичай не вдається. Проте ще тоді, коли колонки в хроматографії були малоефективними, було знайдено і засіб для вирішення таких завдань - використання розчинника, елююють сила якого поступово збільшувалася. Це призводило до того, що як слабо, так і сильно утримувані речовини виходили з колонки за прийнятно короткий час, при цьому зони сильно утримуваних сполук звужувалися і давали більш вузькі і симетричні піки. Коли ефективність колонок була підвищена, популярність градієнтного елюювання дещо зменшилася, однак для багатьох об'єктів до теперішнього часу це єдино прийнятний варіант - ВЕРХ з градієнтом розчинника, або градієнтна ВЕРХ (ГВЕЖХ).
З якими ж проблемами стикається дослідник, переходячи від ізократіческой ВЕРХ до градієнтної? Проблем тут декілька, і розгляд їх доцільно розділити на пов'язані з конструкцією приладу, з вибором колонки і з вибором розчинника для ГВЕЖХ.
Прилад для градієнтної ВЕРХ, як видно з самого визначення, повинен мати пристрій для зміни складу розчинника за заданою дослідником програмі. Можливі два варіанти такого пристрою: створення градієнта при низькому тиску розчинників з подачею суміші в насос і соеданіе градієнта при високому тиску, коли кожен з розчинників (сильний і слабкий) подається своїм насосом із змінною швидкістю, так щоб елююють сила суміші збільшувалася. У приладі для ГВЕЖХ, крім звичайних вузлів, з'являються додатково програматор (пристрій формування градієнта), керовані ним система клапанів або другий насос (для градієнта низького і високого тиску відповідно), змішувач. Цим обумовлений перший недолік ГВЕЖХ - прилади для неї приблизно вдвічі дорожче, ніж для ізократіческой ВЕРХ.
Нерідко до складу системи для ГВЕЖХ доводиться додавати дорогий пристрій для ефективної дегазації розчинників продуванием гелію, дією вакууму на розчинник, що подається через спеціальні напівпроникні трубки і т.д. Це пов'язано з тим, що при змішанні погано дегазованих розчинників завжди виділяються бульбашки, так як розчинність газу в суміші розчинників зазвичай відрізняється від суми розчинність в чистих розчинниках. Це особ...
