х з Ој-стірогелем (від 10 3 вЉ• і вище), за даними фірми В«УотерсВ», придатні тетрагидрофуран, ароматичні та хлоровані вуглеводні, гексан, циклогексан, діоксан, тріфторетанол, гексафтор-пропанол і диметилформамід.
Ступінь набухання частинок гелю в різних розчинниках неоднакова, тому заміна елюенту в колонках з даними сорбентами може призвести до зниження ефективності за рахунок зміни обсягу гелю і утворення пустот. При використанні невідповідних розчинників (Ацетон, спирти) відбувається настільки сильна усадка гелю, що колонка виявляється безнадійно зіпсованою. У сорбентів з малим розміром пор (типу Ој-стірогеля 100 вЉ• і 500 вЉ•) така усадка спостерігається як в полярних, так і в неполярних розчинниках, тому з ними, крім того, не можна працювати в насичених вуглеводнях, фторованих спиртах та диметилформамиде. Зручним, хоча і досить дорогим виходом з положення є використання окремих наборів колонок для кожного застосовуваного розчинника. Деякі фірми з цією метою випускають колонки з одним і тим же розміром пір, заповнені різними розчинниками - тетрагідро-фураном, толуолом, хлороформом і диметилформамід.
Для запобігання усадки гелю рекомендується наступний спосіб заміни розчинника: колонку, що містить розчинник А , приєднують до насоса, встановлюють швидкість потоку розчинника А 0,3-0,5 мл/хв, проводять градієнтне зміна складу елюенту від 0 до 100% розчинника В зі швидкістю 1%/хв і промивають з тією ж швидкістю розчинником В протягом 1,5-2 ч. Різка зміна полярності розчинника майже завжди призводить до погіршення характеристик колонки, і його краще взагалі уникати. Якщо така заміна все ж необхідна, то слід використовувати проміжний розчинник. Так, толуол спочатку замінюють на тетрагидрофуран і через 1-2 дні - на диметилформамід. Падіння ефективності при цьому буде менше, ніж при одностадійної заміні розчинника. У будь-якому випадку заміна рухомої фази у високо-
ефективних колонках з напівжорсткими гелями залишається вельми делікатною операцією, що вимагає особливої вЂ‹вЂ‹обережності. У принципі можливе приготування таких колонок і для роботи з полярними розчинниками. Потрібний розчинник при цьому використовують при набиванні колонки. Однак внаслідок малої набухаемости гелів у цих розчинниках одержувані колонки зазвичай мають більш низьку ефективність.
При поділі макромолекул основний внесок у розмивання смуги визначається утрудненою массопередачи. До жаль, багато з застосовуваних елюентів мають високу в'язкість. Для зниження в'язкості (а також для поліпшення розчинності) екс-клюзіонную хроматографію часто проводять при підвищених температурах, що істотно покращує ефективність хроматографічної системи.
Аналіз більшості полімерів на жорстких гелях часто ускладнюється їх адсорбцією. Для придушення адсорбції зазвичай використовують розчинники, які адсорбуються на насадці колонки сильніше, ніж аналізовані речовини. Якщо з якихось причин це ...
