, яка міститься в воду, яка знаходиться в прозорому термостатіруемого відсіку при 37 В° С (2), і висвітлюється збоку світлодіодами червоного кольору світіння (3). Зображення області контакту плазми (4) з активатором (5) фокусується на ПЗС матриці фотокамери (6) за допомогою фотооб'єктива (7). Оцифроване ПЗС камерою зображення передається в комп'ютер. br/>
Спостереження за фібріновим згустком проводиться за методом темного поля. Експериментальна кювету у водяному термостаті висвітлюється збоку під кутом 45 Вє світлодіодами червоного кольору (довжина хвилі світіння +660 нм). Розсіяний згустком світло фокусується на цифрову відеокамеру фотооб'єктивом.
Для проведення експерименту, збору та попередньої обробки даних використовується спеціальна програма Tromboimager (ТОВ В«ГемакорВ»). Після приміщення активатора в кювету програмі дається команда почати зйомку, далі кожні 15 секунд просторова картина інтенсивності світлорозсіювання (витримка складає 50 мсек) записується на жорсткий диск. p align="justify"> При обробці всі отримані зображення покладаються симетричними щодо перпендикуляра до активатора. Це дозволяє перейти від двовимірних розподілів інтенсивності світлорозсіювання до одномірним на відрізках, проведених вздовж поширення зростання тромбу. На першому етапі обробки даних по светорассеянія вибирається вузька смуга, перпендикулярна активує поверхні (репер). Уздовж цієї смуги для всіх моментів часу обчислюються профілі інтенсивності реєстрованого сигналу. При цьому, для зниження шумів, вироблялося усереднення значень светорассеянія всередині смуги у напрямку, перпендикулярно зростанню згустку (тобто паралельно активатору). Перший, фоновий, профіль светорассеянія віднімається з усіх наступний експериментальних профілів. p align="justify"> Планшетний фотометр: Для перевірки активації протромбіну і фібриногену використовувався 96-ямковий планшетний фотометр. В лунки з буфером (0.5% БСА, 20mM HEPES, 140mM NaCl) pH7.4 додавався: 1: фібриноген [2мг/мл] c протромбіну [4мкм]. 2: фібриноген [2мг/мл] c протромбіну [4мкм] і активним чинником XIa [240нМ]. 3: фібриноген [2мг/мл] c протромбіну [2мкм] і активним чинником XIa [240нМ]. 4: фібриноген [2мг/мл] c протромбіну [4мкм] і урокіназою [1000МЕ/мл]. 5: фібриноген [2мг/мл] c активним чинником XIa [240нМ]. Вимірювалося светорассеяніє утворюється фібрину (довжина хвилі 450 нм). Попередньо оцінювалася чутливість фотометра по тромбину: концентрація тромбіну більш 1.5nM успішно реєструвалася. br/>
Результати та обговорення. Розробка методики дослідження фібринолізу
Для дослідження процесу фібринолізу було вирішено використовувати систему Відеомікроскопи Tromboimager (ТОВ В«ГемакорВ»), яка успішно використовується для діагностики стану системи згортання і дозволяє реєструвати просторову динаміку зростання фібринового згу...
