Сибірський Державний Медичний Університет
Кафедра Біології і Генетики
Звіт по літній виробничій практиці
Виконав:
Ш. В. Д.
(МБФ гр.4902)
р. Томськ 2010
Цілі експерименту:
Г? Визначити лінію самця (Cu, ct, vn (vu) (?)) виду Drosophila melanogaster якого В«вибереВ» самка wa (?) для схрещування.
Г? Записати і проаналізувати результати експерименту.
Об'єкт, на якому ми проводили дослідження:
мухи дрозофіли виду Drosophila melanogaster. Вибір об'єкта зумовлений низкою переваг:
Гј Висока плодючість (від 50 до 200 нащадків)
Гј Нетривалий цикл розвитку (дозрівання яєць 10-12 діб, тривалість життя 3-4 тижні)
Гј Малому числом хромосом (гаплоїдний набір хромосом дорівнює 8 (2n = 8))
Гј Мухи дрозофіли добре вивчені (відомо велика кількість генів, які визначають добре помітні ознаки)
Гј Комфортність розведення (харчування не вимагає особливих витрат)
Гј Чіткий поділ за статтю (самці дрібніше самок і ін)
Методика роботи:
Приготування поживного середовища (за рецептом).
Об'єкти: вид Drosophila melanogaster лінії Cu, ct, vn (vu) (?) і wa (?).
Особливості ліній:
v Cu (?) - крила загнуті вгору
v Ct (?) - крила з вирізками
v vn (vu) (?) - крила без жилок
v wa (?) - колір очей абрикосовий
У самки дрозофіли після спарювання життєздатна сперма зберігається в статевих шляхах протягом декількох діб. Тому у заплідненої самки в будь-який даний момент в сім'яприймача може перебувати деякий кількість сперми від попередньої копуляції. З цієї причини для схрещування необхідно брати незайманих (Віргінія) самок. З цією метою перед постановкою схрещування в тій лінії, де необхідно отримати незайманих самок, всіх мух необхідно витрусити з пробірки. Так як самки і самці дрозофіли протягом 6-8 год після вилуплення нездатні до запліднення, всі мухи, відібрані за цей період, незаймані. p align="justify"> У перші 2 ... 3 год після вильоту у мух НЕ розправлені крила і тіло подовжене, світле. У незаплідненою самки забарвлення покривів тіла світло-сіра. У нещодавно вилупилися самців тіло світло-сіра, а на кінчику черевця видно чорна точка; лише через кілька годин кінчик черевця у самців стає повністю чорним. p align="justify"> Для схрещування 3 ... 5 незайманих самок відповідної лінії поміщають в одну пробірку з такою ж кількістю самців іншої лінії. Ці мухи становлять батьківське покоління. При збільшенні кількості батьків з'являється небезпека перенаселення, в результаті чого плодючість мух падає. Вона самка може відкласти до 200 яєць, але в перші 1,5-2 доби після вилуплення самки зазвичай не відкладають яєць або відкладають їх дуже мало. Максимальна кількість яєць відкладають 3 ... 4-добові самки. Кладка яєць найкраще відбувається на живильне середовище з добре пророслими дріжджами, тобто через 1 ... 2 доби після її приготування. Вживання середовища через 3 ... 4 діб після варіння не рекомендується. p align="justify"> Для відкладання яєць мухи повинні знаходитися в пробірці 3 ... 5 діб, після чого їх викидають, а з відкладених яєць розвивається наступне покоління мух. Підрахунок мух доцільніше проводити на 2 ... 3 добу після початку вильоту. У більш ранні терміни вилітають переважно самки, а в пізніші спостерігається загибель мух. br/>
Хід роботи:
Взяли 20 пробірок, в кожну з яких посадили самку лінії wa (?) і по 3 штуки самця кожній лінії Cu (?), ct (?), vn (vu) (?). Після схрещування всі гібриди першого покоління виявилися дикого типу. Для отримання другого покоління ми видалили батьківські особини (для більш високої точності результатів) і пересадили перше покоління F1 в нове середовище. По закінченню 10 діб ми отримали і проаналізували друге покоління F2. br/>
В§ Батьківське покоління:
№ проб.1234567891011121314151617181920ЛинииCu, ct, vn (vu) (?) і wa (?)
В§ Покоління F1:
№ проб.1234567891011121314151617181920Признаки лінійДікій тип муха дрозофіла схрещування
В§ Покоління F2:
1234567891011121314151617181920Прізнакі лінійctctctctctvnctctctvnctctvnvnctctctctctCu
Проаналізуємо таблицю В«Покоління F2В»:
o Ct - 75%
o Vn - 20%
o Cu - 5%
Висновок:
У 75% випадків самка wa (?) В«вибираєВ» самця лінії Ct. Залучаючи самку, самці дрозофіл виробляють особливий ледь чутний звук. Науково доведено, що у мух дрозофіл близько 2 тисяч клітин мозку, які відповідають за шлюбну поведінку. При цьому більшість цих нейронів присутні і в мозку самок. p align="justify"> Жіночі особини злучалися з представниками трьох ліній. Ретельно проаналізувавши генетичні параметри самок, щоб мати можливість порівняти рівні експресії генів для випадків спаровування з самцями з різних ліній. Як з'ясувалося, вибір самця з "чужої" лінії не чинить практично ніякого впливу на вищезгадані рівні експресії, але при цьому його генотип впливає на визначення самкою партнера для спаровування та її плодючість. p align="justify"> Дані результати дають можливість зробити висновок про те, що зазначені процеси регулюються генетичними механізмами, закладеними порівняно давно, відразу після настання статевої зрілості.
