Методи люмінесцентної вірусології
люмінесценція флуорохромірованіе антитіло
Сутність явища люмінесценції полягає в здатності деяких речовин світитися під впливом різних видів енергії.
Для порушення люмінесцентного світіння багатьох речовин частіше використовують ультрафіолетовий ділянку спектра світла, однак у ряді випадків застосовують і видиму частину, прилеглу до ультрафіолетової області.
При люмінесцентному аналізі слід мати на увазі одну закономірність, іменовану правилом Стокса: спектр випромінювання люмінесцирующих речовин зрушать по відношенню до спектру збудливого джерела в бік більш довгих хвиль. Отже, у речовин, поглинаючих ультрафіолетове світло, флуоресценція може бути будь-якого кольору, але речовини, флуоресценція яких порушується синім світлом, не можуть світитися фіолетовим, а тільки зеленим, жовтим або червоним. Треба пам'ятати не менше важлива обставина - вихід флуоресценції. Поняття виходу флуоресценції було введено С.І. Вавілов і виражає відношення енергії випромінювання до енергії, поглиненої люмінесцирующим речовиною. Вихід флуоресценції залежить від різних умов: температури, концентрації речовини і т.п. Так, багато органічні сполуки в кристалічному стані не флуоресціюють, але дуже сильно флуоресціюють в розчинах. При цьому немає прямої залежності між концентрацією речовини в розчині і ступенем флуоресценції. Як правило, більш концентровані розчини дають меншу флуоресценцію, ніж розлучені. p align="justify"> Для кожного флуоресціюючого соеденения існує оптимальна концентрація його в розчині, при якій воно флуоресціює в найбільшою мірою.
У біології використання феномена люмінесценції розвивалося в 2 напрямках.
. Вивчення власної, тобто первинної, люмінесценції тканин тварин, рослин, мікробів ... Цей спосіб застосовують при діагностиці деяких захворювань, зокрема грибкових, при визначенні ступеня і характеру псування м'ясних, рибних та овочевих продуктів.
. Вивчення вторинної, тобто ззовні привнесеної, люмінесценції. Для цього препарати забарвлюють флуоресціюючими барвниками-флуорохромами.
флуорохромами зазвичай застосовують у великих розведеннях, що дозволяє здійснювати прижиттєву забарвлення досліджуваних об'єктів.
Для люмінесцентного фарбування препаратів запропоновані флуоресцеїн, родамін, акридиновим помаранчевий, акридиновим жовтий, аурамін, коріфосфін, прімулін.
Перед фарбуванням флуорохромами препарати фіксують. Для цього їх попередньо висушують при 18-22 0 або в термостаті (37 0
