илися функціональних груп з високополярние кислотними залишками глюкуроновою, сірчаної кислот, деякими амінокислотами та ін. В результаті цього процесу гідрофільність молекул метаболітів зростає настільки, що вони легко виводяться із сечею. Не всі ЛВ метаболізуються за вказаною двофазної системі. Деякі з них утворюють кон'югати, минаючи першу фазу, інші після першої фази виводяться нирками без наступної кон'югації.
На біотрансформацію ЛВ впливають стать, вік, умови життя, характер харчування, захворювання і т.д. Крім впливу різних захворювань, можливі також індивідуальна варіабельність кінетики метаболізму, індукція і пригнічення метаболизирующих ферментів. Все це свідчить про те, що біотрансформація ЛВ є надзвичайно складним процесом, що залежать від багатьох екзогенних та ендогенних факторів. Дослідження механізму процесів метаболізму - проблема, яка входить в коло завдань різних областей хімічних, біологічних, фармацевтичних наук, у тому числі фармацевтичної хімії. [6,19,21]
ГЛАВА II. Методи, використовувані в біофармацевтичних АНАЛІЗІ
У процесі проведення біофармацевтичного аналізу необхідно проводити ідентифікацію та кількісне визначення лікарських речовин та їх метаболітів в біологічних рідинах таких, як сеча, слина, кров та ін. Тільки застосування високочутливих і Недеструктивні методів дозволяє провести біофармацевтичні дослідження. До таких методів в першу чергу відносяться фізико-хімічні методи аналізу.
Правильний вибір методу визначення концентрації в чому визначає успішне вирішення всієї задачі дослідження. Вимогам, пропонованим до біофармацевтичних аналізу, відповідають тільки чутливі фізико-хімічні методи. Класичні хімічні методи аналізу (гравіметричні і тітріметріческіе) через низьку чутливості для цієї мети непридатні. Існують різні класифікації фізико-хімічних методів. [14]
За однією з них (Бєліков В.Г., 1987) всі ці методи поділяються на такі групи:
Оптичні методи (рефрактометрия, интерферометрия, поляриметрия).
Методи, засновані на поглинанні випромінювання (абсорбція методи) - ультрафіолетова спектрофотометрія, фотометрія, фотоколориметрія, колориметрия, фототурбідіметрія, фотонефелометрія, інфрачервона спектроскопія, спектроскопія комбінаційного розсіювання, атомно-адсорбційна спектрофотометрія, рентгенівська абсорбційна спектроскопія.
Методи, засновані на випущенні випромінювання - люмінесцентні методи (флуориметр, хемілюмінометре), атомно-емісійна спектроскопія, радіохімічні (радіоізотопні) методи, рентгенівська флуоресценція, екстракційно-флуоресцентний аналіз.
Методи, засновані на використанні магнітного поля - ЯМР-спектроскопія (ядерного магнітного резонансу), мас - спектрометрія.
Електрохімічні методи - потенціометрія, полярографія, кулонометрія, кондуктометрія.
Термічні методи - термографія, термофрактографія, калориметрія.
Методи поділу - екстракція, хроматографічні методи, електрофорез.
Процес виконання біофармацевтичного аналізу включає кілька послідовно виконуваних стадій:
екстракцію з біологічної рідини;
поділ;
ідентифікацію;
кількісне визначення лікарської речовини або його метаболітів.
ЕКСТРАКЦІЯ - процес розподілу речовини між двома несмешивающимися рідкими фазами (органічний розчинник - вода). Для проведення екстракції до води додають екстрагент - органічний розчинник, малорозчинний або нерозчинний у воді, і суміш збовтують для прискорення розподілу розчинених речовин між двома рідинами. Перед екстракцією необхідно осадити білки (сульфатом амонію, розчином трихлороцтової або хлорного кислоти). Надосадову рідину декантирують і екстрагують з неї випробовувані речовини. При необхідності кров перед екстракцією піддають консервації гепарином або гемолізаціі растворомі сапонінів.
Процеси екстракції аналізованих лікарських речовин та їх метаболітів з біологічних об'єктів здійснюють за допомогою таких органічних розчинників, як діетиловий ефір, хлороформ, бензол та ін.
Нерідко поєднують в екстрагентів дві розчинника, наприклад хлороформ і гексан, циклогексан і н-бутанол та ін. Такий спосіб називають двофазним екстрагуванням.
Найкраща повнота поділу досягається, якщо послідовно витягують з біологічної рідини лікарська речовина або його метаболіти декількома розчинниками, наприклад ефіром, етилацетатом, хлороформом, ацетоном, водою.
Екстракцію проводять у присутності кислот, лугів або буферних розчинів, створюючи рН середовища, оптимальне для вилучення лікарської речовини або ...
