е тампоном засівають штрихами (з відривом) по всій площі, відведеної для посіву.
Використовують сироватковий агар з додаванням в нього антибіотиків, що пригнічують ріст грампозитивних коків. Для цієї мети застосовується рістоміцін або лінкоміцин в оптимальній концентрації. На одну чашку можна засіяти дві проби. Однак зустрічаються окремі штами менінгококів, більш чутливі до лінкоміцину, тому ті ж проби одночасно засівають на половину чашки з сироватковим агаром без лінкоміцину.
За відсутності лінкоміцину або ристомицина можна використовувати диски з цими антибіотиками. Диски (не більше 2-х) накладають безпосередньо на поверхню засіяного сироваткового агару. У цьому випадку на 1 чашку сіють тільки одну пробу. Через одну добу навколо диска, в зоні 1 см, зріст грампозитивної флори буде пригнічений, що збільшує можливість виділення колоній нейсерій.
Засіяні чашки доставляють у лабораторію, ретельно захищаючи їх від охолодження, в зимовий час застосовують грілки (+35 - +40 0 С) і негайно поміщають в термостат при +37 0 С.
Тампони з досліджуваним матеріалом, занурені в напіврідку або транспортну середу, доставляють у лабораторію, також ретельно захищеними від охолодження. Тампони в 0,1% напіврідкому агарі (збагачення) поміщають у термостат для підрощування флори.
Змочені тампони або тампони в транспортній бульонной середовищі засівають на чашку з сироватковим агаром, позбавленим інгібітора, без попереднього підрощування. Посів роблять віджатим тампоном. Засіяні чашки поміщають в термостат. p> При транспортуванні матеріалу на коротку відстань (1 - 2 години їзди до лабораторії) застосування транспортних середовищ не рекомендується. При транспортуванні протягом 2 - 4:00 доречно застосування тампонів, змочених живильним середовищем. При транспортуванні протягом 3-х годин і більше тампони перевозять, зануреними в транспортну середовище.
Напіврідка середу збагачення може використовуватися незалежно від термінів транспортування.
2-й день дослідження
Переглядають чашки, засіяні напередодні, візуально і під лупою-мікроскопом МБС, підозрілі колонії відсівають на сектори чашки з сироватковим агаром (не менше 3 - 5 колоній). На середовищах з інгібіторами виростають тільки грамнегативні бактерії, переважно представники нейсерій. При відсутності росту в чашках з антибіотиками проводять повторний перегляд їх через 40 - 48 годин після посіву. У цю ж добу роблять висів з полужидкой (0,1%) середовища збагачення на чашку з сироватковим агаром без інгібітору.
3-й день дослідження
Вивчають зростання чистих культур, відсіяних з окремих колоній у попередній день. Культури, колонії яких мають жовтий пігмент різної інтенсивності, а також характеризуються "Сухим" зростанням, відкидають. Слід мати на увазі, що на сироватковому агарі колонії менінгококів можуть виглядати жовтуватими через відтінку середовища. Тому для виявлення пігменту їх необхідно переглядати при денному освітленні.
Для подальшого дослідження на менінгококи залишають тільки непігментовані культури, що дають ніжний вологий зростання. З них готують мазки, проводять мікроскопію чистої культури. У перших генераціях для менінгококів характерні поліморфізм і варіабельність забарвлення, що не спостерігається у непатогенних нейсерій. Після мікроскопії подальшу ідентифікацію культур проводять за вище описаним тестах.
Якщо зростання культури з відсіяних колоній досить рясний, то в цю добу ставлять реакцію аглютинації з группоспецифических сироватками.
4-й день дослідження
Переглядають посіви, зроблені в попередній день. Враховують результати зростання на бессивороточной і жовчному агарі (при +37 0 С), цукролітичні активність, ставлять реакцію з водним розчином Люголя на продукцію полісахариду, проводять остаточну серологічну ідентифікацію менінгококів з реакції аглютинації.
У цей же день видають остаточний позитивну або негативну відповідь. Результати бактеріологічного дослідження з полужидкой середовища, відповідно, будуть отримані на добу пізніше.
Дослідження трупного матеріалу
Патологоанатомічне розтин бажано проводити в найбільш ранні терміни після смерті. Для бактеріологічного дослідження направляють кров, ліквор, шматочки головного мозку (або гній, взятий тампоном з м'якої мозкової оболонки, у випадках менінгококцемія - з печінки, селезінки, легені, наднирників і т.д.). Кров беруть стерильно із правого серця, після розтину скальпелем, за допомогою стерильною піпетки з грушею в кількості 7 - 10 мл. З них 2 - 3 мл засівають в 25 мл 0,1% напіврідкого агару, а що залишилися - 5 - 7 мл використовують для інших досліджень (серологічних, в ВІЕФ і т.д,). Для посівів можна використовувати, також згустки крові з великих судин.
Ліквор беруть стерильною піпеткою з близько оболочечного простору (під час вилучення головного мозку...
