човин
Висушена платівка є хроматограмою досліджуваних речовин. Якщо речовини є забарвленими, то ідентифікація починається з визначення кольору розділених речовин.
Але в більшості випадків колективні речовини безбарвні і просте візуальне порівняння неможливо.
Для тонкошарової хроматографії існує кілька видів якісного аналізу (ідентифікації) розділених речовин:
В· Візуальні методи та визначення R f розділених речовин. p> В· Кольорові реакції. p> В· Порівняння зі свідками. p> В· Фізико-хімічні методи ідентифікації. p> Розглянемо докладніше кожен вид якісного аналізу в тонкошарової хроматографії. [3, 4]
1.4.11 Фізичні методи
Візуальні методи використовуються в основному, для визначення місця розташування плям розділених речовин на хроматографічної платівці. Для цього пластинку розглядають як у видимому світлі, так і використовуючи ультрафіолетове світло (в основному світло з довжиною хвилі 366 і 254 нм). Це перший етап ідентифікації, на якому визначається якість підібраних умов та отриманих результатів хроматографування.
Так, визначивши якість хроматографування (відсутність "хвостів" поділюваних речовин або перекриття їх плям, правильну форму і розміри, відсутність злиття хроматографічних доріжок тощо) та визнання придатним проведеного поділу для подальшого дослідження, визначають R f виявлених плям. [3]
1.4.12 Значення R f
Одним з основних показників у ТШХ є показник R f . Цей параметр є аналогією часом утримування і залежить як від властивостей поділюваних речовин, складу рухомої фази і сорбенту, так і від фізичних параметрів. Визначення значення R f проводять як відношення відстані минулого речовиною до віддалі, що пройшов фронтом розчинника
R f = L/L 0
Значення R f - величина безрозмірна і має значення від 0 до 1. Проте в літературі нерідко зустрічається такі показники як hR f , R f Ч100, які є тим же R f , але помноженими на 100, для того, щоб не оперувати десятковими значеннями.
На значення R f не впливає відстань пройдена фронтом розчинника, однак у багатьох методиках описується проходження фронту на відстань 10 см. Це використовується тільки для облечения розрахунків R f .
На практиці, на початку визначають відстань минуле фронтом розчинника: від лінії старту (а не від краю пластинки) до місця, де знаходився фронт у момент закінчення хроматографування. Потім визначають відстань від лінії старту до плями розділеного речовини. Під тут і робить вплив розмір плями! Адже якщо пляма має круглу форму і невеликий розмір, то отримане R f має чітке значення. А якщо отримане пляма має великий розмір або неправильну форму, то при визначенні R f такої плями, помилка може досягти 0,1!
У разі розподіль...
