сно, наскільки важлива функція ГПО в патогенезі запальних процесів.
Уявлялося доцільним вивчити поведінку цих речовин у дослідах in vitro , що включають більш складний об'єкт - природні біологічні мембрани.
Матеріали і методи
. Дослідження інтенсивнихта індукованого ПОЛ
. Визначення концентрації білка по методу Бредфорда
В якості подібного об'єкта ми використовували мікросоми печінки щурів - виділені за допомогою диференціального центрифугування мембрани ЕПР, оскільки ця структура багата субстратами ПОЛ - моно - і поліненасиченими жирними кислотами; в її складі функціонують ланцюга перенесення електронів, що створює умови для утворення радикальних форм кисню; багато ферментів мікросом відносяться до металопротеїни, тобто пов'язані з металами змінної валентності, що також грає роль в активації ПОЛ. Використання мікросом дозволяє певною мірою стандартизувати умови проведення досвіду. Отримані результати наведені в таблиці 2. Постановка експерименту була загальноприйнятою [25] і полягала в штучному індукуванні перекисного окислення ліпідів мембран мікросом за допомогою аскорбінової кислоти та іонів заліза (сіль Мора). Додавання цих компонентів в реакційне середовище сприяло утворенню активованих кисневих метаболітів (гідроксильних радикалів, пероксидних радикалів жирних кислот і т.д.). Після інкубації протягом 20 хвилин в пробах спектрофотометрически визначалося кількість вторинного продукту ПОЛ - малонового діальдегіду. За рівнем його накопичення судили про антиоксидантної активності додаються в реакційне середовище досліджуваних речовин. Для порівняння використовували ионол. Контролем служили зразки без активних речовин, але з додаванням розчинника (ДМСО), який сам має деяким антиоксидантним ефектом.
Як видно з наведених даних, переважна більшість сполук, що показали в попередньому досвіді антиоксидантний ефект виявляло подібну активність і в більш складній системі. Проте були й винятки. Загалом, подібна поведінка антиоксидантів не є несподіваним. Відомо, що ускладнення системи, в якій проводяться випробування антиоксидантних властивостей призводить іноді до зниження ефективності препарату [24]. (Саме цим фактом ми керувалися, застосовуючи в досвіді концентрації речовин дещо вищі, ніж отримані для них величини IC 50.) Більш того, у виняткових випадках може змінюватися сама спрямованість ефекту - з антиоксидантною до прооксидантної. Це пов'язано з синергическим ефектом при взаємодії декількох слабких чинників в живому об'єкті, що призводить до їх різкого посилення. Наприклад, в клітці в певних умовах може значно зростати енергія слабких радикальних сполук, їх перетворення на активаторів ПОЛ, тоді як у нормі самі по собі вони є інгібіторами ПОЛ саме через своїх радикальних властивостей і не представляють небезпеки через низьку енергетичності. Це показано, зокрема, в дослідах із застосуванням вітаміну Е [1]. Зрозуміло, в кожному подібному випадку причини зміни ефектів одного і того ж з'єднання в різних умовах досвіду можуть бути абсолютно різні, але всі вони, безумовно, пов'язані із взаємодією того чи іншого з'єднання з якимись структурами у досліджуваній системі.
Як і в першій серії дослідів, з'єднання KDA - 150, DVD - 2521, KDA - 132, BO - 20, NAA - 85, DVD - 8843, DVD - 2808, DVD - 26 проявили антиоксидантну активніст...
