водою. У центрифужну пробірку на 10 см 3 вносять піпеткою 5 см 3 відфільтрованого екстракту, 0,5 см 3 насиченого розчину оцтовокислого свинцю. Осад центрифугують. 1 см 3 надосадової рідини переносять в круглодонну колбу з шліфом ємністю 10 ... 25 см 3 . Туди ж на поліетиленовій платівці вносять наважку ксиліту 5 ... 10 мг. Вміст колби упарюють на роторному випарнику при 60 "С під вакуумом.
1.2. Продукти з високим вмістом жиру (більше 1,5%).
1.2.1. Продукти з вмістом лимонної кислоти менш 1,5% (дитяче молочне харчування, сухі молочні суміші та ін.) Наважку середньої гомогенизированной проби продукту з високим вмістом сухих речовин (більше 60%) в кількості 500 ... 1000 мг поміщають в центрифужну пробірку. Туди ж на поліетиленовій платівці вносять з точністю до 0,0001 г наважку ксиліту 2 ... 5 мг. Проводять екстракцію з 2 см 3 гексану з подальшим центрифугуванням. Екстракцію проводять тричі, декантіруя гексановий шар. Залишки гексану висушуються в струмі азоту, після чого проводять сілілірованіе.
Пробу згущеного молока зважують у центрифужной пробірці і проводять знежирення, як описано вище, потім додають 20 см 3 50%-ного водного розчину етанолу, ретельно перемішують, потім обробляють аналогічно рідким молочним продуктам.
10 см 3 рідких молочних продуктів поміщають в центрифужну пробірку, змішують з 10 см 3 96%-ного етанолу, витримують 30 ... 40 хвилин і центрифугують при 4000 об/хв протягом 10 хвилин. 1 см 3 надосадової рідини поміщають в круглодонну колбу, туди ж на поліетиленовій платівці вносять 2 ... 5 мг ксиліту, вміст упарюють насухо на роторному випарнику при 60 В° С, після чого проводять сілілірованіе.
1.2.2. Продукти з вмістом лимонної кислоти більш 1,5% та хлібобулочні вироби. Наважку середньої гомогенизированной проби продукту в кількості 10 ... 15 г, зважену з точністю до 0,0001 г, поміщають у центрифужну пробірку і піддають тричі екстракції 30 см 3 гексану, об'єднуючи гексановий шар Декантірованіе. Осад шпателем переносять у конічну колбу місткістю 100 см 3 , ретельно змиваючи залишки зі шпателя і пробірки 75%-ним розчином етанолу. Потім тричі екстрагують вміст колби 75%-ним розчином етанолу, підігріваючи колбу на водяній бані при 60 В° С. Відфільтровані екстракти об'єднують і доводять дистильованою водою до мітки в мірній колбі на 100 см 3 . У мірну пробірку на 10 см 3 вносять 5 см 3 екстракту і 0,5 см 3 насиченого розчину оцтовокислого свинцю. Після випадання осаду надосадову рідину в кількості 1,0 см 3 переносять у круглодонну колбу місткістю 10 ... 25 см 3 . Туди ж вносять на поліетиленовій платівці 2 ... 5 мг ксиліту (з точністю до 0,0001 г) і вміст колби упарюють на роторному випарнику при 60 В° С під вакуумом, після чого проводять сілілірованіе.
2. Сілілірованіе цукрів.
2.1. Спосіб з використанням тріфторуксусной кислоти. У підготовлену наважку зразка доливають 1,0 см 3 піридину (нуклеофільний каталізатор), 0,9 см 3 гексаметілдісілазана, 0,1 см 3 тріфторуксусной кислоти (полегшує алкилірованіє), щільно закривають і енергійно струшують протягом 30 секунд. Спочатку спостерігають розшарування рідини на 2 фази, при цьому нижній шар незначний. У міру стояння розчину протягом 20 ... 30 хвилин це розшарування зникає і починає виділятися аміак, що вказує на успішне протікання реакції сілілірованія:
В
Після припинення виділення аміаку розчин витримують 12 годин при кімнатній температурі або 1 годину при 60 "С. Тривало зберігається розшарування, що зникає тільки при нагріванні, говорить про тому, що реакція сілілірованія пройшла не повністю через високого вмісту вологи (більше 40%) або підвищеного вмісту вуглеводів. У цьому випадку підготовку проби повторюють, зменшивши при цьому наважку або збільшивши час висушування на роторному випарнику.
2.2. Спосіб з використанням триметилхлорсилан. У підготовлену наважку зразка доливають точно 1,0 см 3 піридину, 0,2 см 3 гексаметілдісілазана і 0,1 см 3 триметилхлорсилан, струшують протягом 1 хвилини і нагрівають у термостаті 45 хвилин при 60 В° С:
Потім хроматографіруют.
В
Для спрощення ідентифікації та кількісних розрахунків (якщо не потрібне знання аномерного складу цукрів) визначення цукрів виробляють у вигляді ТМС-похідних цукрів. У підготовлену пробу зразка додають 100 г гідроксиламіну солянокислого, доливають 10 см 3 піридину і витримують у термостаті при 80 В° С протягом 2 годин:
В
Охолоджують і далі доливають сілілірующіе агенти.
3. Газохроматографічний аналіз.
3.1.
