ород. Набори тест - систем різні за змістом антитіл до якого - або маркеру вірусного гепатиту і за змістом антигенів вірусних гепатитів. Застосовували наступні тест - системи: «ІФА - HbsAg », «ІФА - АНТИ - HBs », «ІФА - АНТИ - < i align="justify"> HBc »,« ІФА - АНТИ - HCV ».
Для виявлення нуклеїнових кислот вірусів гепатитів методом ПЛР у роботі були використані тест-системи ТОВ «ІнтерЛабсервіс», м. Москва. Для виявлення ДНК вірусу гепатиту В застосовували тест - систему «АмпліСенс HBV - FRT », для виявлення РНК гепатиту С використовували« АмпліСенс HCV - FL »тест - систему. Також за період роботи проводилося генотипування за допомогою тест - системи «АмпліСенс HCV - 1/2/3 - FL ». Дана тест - система призначена для виявлення і диференціювання генотипів вірусу гепатиту З (1,2,3) в клінічному матеріалі методом ПЛР з гібридизаційним - флуоресцентною детекцією.
2.3 Підготовка досліджуваних зразків
В якості досліджуваних зразків використовується не кров, а плазма крові. Для виключення помилкових результатів не можна піддавати досліджувані зразки термоінактівірованію, необхідно відбирати і зберігати їх в умовах запобігають бактеріальний ріст. Кожен зразок слід відбирати новим наконечником. Відібрані зразки зберігають при температурі від 2 до 8? С не более трьох діб. Більш тривале зберігання допустимо при температурі не вище мінус 20? С. Зразки можуть піддаватися замерзання відтавання не більше 1 разу. Плазму від згустку слід відокремити якомога швидше, щоб уникнути гемолізу. Дослідження зразків з вираженим бактеріальним ростом або гемолизом не допускається, оскільки може дати неправильний результат.
.4 Проведення імуноферментного аналізу
.4.1 Загальний склад наборів
. Імуносорбент - з іммобілізованими рекомбінантними антигенами або антитілами.
. Кон'югат - суміш моноклональних антитіл проти шуканого маркера.
. Позитивний і негативний контрольні зразки.
. Блок - розчин - для робочого розведення сироваток.
. Субстратний буферний розчин - містить лимонну кислоту, ацетат натрію, розчин водню перекису.
. Концентрат тетраметілбензідіна - для візуалізації реакції.
. Стоп - реагент - розчин сірчаної кислоти для зупинки реакції.
. Промивний розчин.
. Розчин для розведення кон'югату.
У тест - системі присутні реагенти, потребують попереднього приготування: робочий промивний розчин, робочий розчин кон'югату, субстратна суміш. Решта реагенти вже готові до застосування. Перед використанням тест - системи все реагенти набору необхідно витримати протягом 30 хвилин при температурі від 18 до 24? С.
.4.2 Загальна схема проведення імуноферментного аналізу
. Вийняти з пакета рамку і підготувати необхідну кількість стрипів.
. Внести контрольні зразки в обсязі 100 мкл. Кількість лунок з контрольними зразками залежить від кіл...
