х були отримані методом агроінфільтраціі, а також з використанням векторів на основі вірусів. Переваги цих двох систем в тому, що можна отримати міліграми білка за кілька днів замість декількох місяців, які потрібні для отримання трансгенних або транспластомних ліній рослин.
Відмінності в Глікозилювання у рослин і тварин можуть бути важливі при використанні в медицині антитіл, синтезованих в рослинах. У рослин глікопротеїни мають два вуглеводних залишку, що не зустрічаються у ссавців -? (1,2) - ксилозу і? (1,3) - фукоза Загальна схема глікозилювання білків в клітинах тварин і рослин показана на рис.3
Можливо, ці олігосахаридних залишки можуть стати алергенами для людини, оскільки в крові піддослідних тварин виявлялися специфічні імуноглобуліни IgE проти рослинних вуглеводних детермінант, хоча в недавніх експериментах на мишах цей результат не підтверджується. У тваринних клітинах ключовим ферментом, яка перевертає N-глікани рослин в N-глікани ссавців, є? (1,4) - галактозілтрансфераза. Було проведено схрещування трансгенних рослин тютюну, що синтезують цей фермент, з рослинами - продуцентами важкої і легкої ланцюгів антитіл. У отриманого потомства, яке містить всі три білка, до 30% імуноглобулінів мали галактозілірованние N-глікани.
Багато рекомбінантні антитіла, спочатку синтезуються в рослинах, секретувати в апопласт. Однак не так давно показано, що для посилення стабільності антитіл необхідно використовувати сигнальний лідерних пептид і С-кінцевий сигнал KDEL (лізин-аспартат-глутамат-лейцин) для утримування в ЕПР (ЕПР), а також для запобігання додавання до антитіл імуногенних N-гліканів. Білки рослин, пов'язані з ЕПР, містять N-глікани маннозного типу, які є звичайними і для тварин і тому, вони не повинні бути імуногенні. Нещодавно показано, що химерні мишачо-людські антитіла, які мають KDEL-сигнал на легкій і важкій ланцюга, збиралися у функціональну форму H2L2, і містили 6-9 залишків манози.
Останнім часом проводяться експерименти по зміні глікозилювання білків людини в трансгенних рослинах. Ймовірно, ця проблема буде вирішена тим чи іншим шляхом і антитіла, синтезовані в рослинах, будуть широко використовуватися в медицині.
Одним з перших продуктів на основі трансгенних рослин тютюну, підготовленим до великомасштабного виробництва, є препарат CaroRx, що представляє собою секреторні антитіла IgA проти Streptococcus mutans - основного збудника карієсу. Ці антитіла при нанесенні їх на зуби добровольців виявилися дуже ефективними і запобігали повторне зараження S. mutans на період до двох років. Інші моноклональні антитіла, експресовані в сої - антитіла проти генітального герпесу, можуть також бути впроваджені у виробництво. Ці антитіла, незважаючи на розходження в Глікозилювання, захищали мишей від вірусу герпесу типу 2 так само добре, як і антитіла, синтезовані в культурі клітин людини. Ще одні антитіла, що пройшли фазу I клінічних випробувань - scFv-антитіла проти лімфоми.
Є ряд повідомлень про успішне синтезі в рослинах і в суспензійних клітинах рослин міні-антитіл.
Синтез субодиничних вакцин в трансгенних рослинах
Вперше структурна ідентичність і імуногенність антигену, синтезованого в рослинах, була підтверджена в 1992 р., коли були отримані трансгенні рослини тютюну, експресують поверхневий антиг...
