ен вірусу гепатиту В (HBsAg). Надалі тими ж дослідниками був показаний імунну відповідь у мишей, вакцинованих антигеном, виділеним з листя тютюну. Крім того, отримані рослини картоплі та суспензійн культури тютюну та сої, де антиген експресуватися на рівні до 1700 мкг / г сухої ваги. Показано, що HBs-антиген, що синтезується рослинами картоплі, викликав у мишей більш сильну імунну відповідь, ніж продукується дріжджами. Проведено випробування вакцини на основі трансгенної картоплі на добровольцях і показана її імуногенність при оральному введенні.
Нами отримані рослини тютюну, експресують рекомбінантний ген поверхневого антигену вірусу гепатиту В (HBsAg) під контролем одинарного та подвійного промоторів 35S РНК вірусу мозаїки цвітної капусти. Використання подвійного промотора 35S збільшило синтез антигену до 0.05% від сумарного розчинного білка. Отримані також трансгенні рослини картоплі, експресують ген поверхневого антигену вірусу гепатиту В (HBsAg) під контролем цього ж промотора і промотора гена пататіна бульб картоплі. Зміст HBs-антигену в бульбах картоплі досягало більше 1 мкг / г маси бульби і було максимальним в рослинах, що експресують ген НВsАg під контролем подвійного промотора CaMV 35SS. Проведено очищення та аналітична гельфільтраціі HBs-антигена з трансгенних рослин, що показала, що продукт експресії гена HBsAg утворює мультімерной форми і в агрегації HBs-мономерів в імуногенні мультімери бере участь не менше 70-80 молекул мономерів.
До теперішнього часу є публікації по синтезу більше 50 різних людських і тварин антигенів у трансгенних рослинах. Деякі дані по цим рослинам наведені в табл.3.
Таблиця 3. Субодиничні вакцини, синтезовані трансгенними рослинами
БелокРастеніеУровень експрессііПоверхностний антиген оболонки вірусу гепатиту В (HBsAg) табак0.001-0.05% РБ лістьевкартофельдо 10 мкг / г СВ клубнейлюпін150 нг / г СВ каллусаcалат1-5.5 нг / г СВ лістьевфізаліс10 нг / г СВ плодовбанани38 нг/г СВ лістьевЕпітоп HVR1 вірусу гепатиту С, злитий з CTBтабакНет даннихБелок HEV-E2 вірусу гепатиту Етомати50-60 нг / г СВВ-субодиниця термолабільного токсину LT-B з ентеротоксічного штаму E.coliтабак <0.01% РБ 2.5% РБ хлоропластовкартофель3.7-15.7 мкг / г СВ клубнейкукуруза8.7% білка ендоспермаВ-субодиниця холерного токсину СТ-Bкартофель0.3% РБтабак4.1% РБ хлоропластовтомат0.02-0.04% РББелок капсида вірусу гастроентериту людини Norwalk (NVCP) табак0.23% РБкартофель <0.37% РБГлікопротеін вірусу бешенстватомат1.00% РБАнтіген DRg24 вірусу бешенстватабак, шпінатНет даннихГлікопротеін S вірусу гастроентериту свиней (TGEV) арабідопсіс0.07% РБтабак0.02% РБкукуруза <0.01% СВАнтіген сібіреязвенной палочкітабакНет даннихG-білок вірусу RSVтабакНет даннихF-білок вірусу RSVтоматдо 32.5 мкг / г СВ плодовГлікопротеін В цитомегаловірусу человекатабак <0.02 РБГемагглютінін вірусу кору (MV-H) морква, табакНет даннихБелкі вірусу папіломи людини (L1) Nicotiana benthamiana картофель0.2-0.5% РБСтолбнячний токсин TetCтабак10-25% РБ хлоропластовБелок VP1 вірусу ящураарабідопсіс, люцерна, картофельНет даннихS1-білок коронавірусу атипової пневмоніітабак, томатиНет даннихКапсідний білок p24 вірусу HIV - 1табак0.35% РББелок Tat вірусу HIV - 1картофель0.0015% РБшпінат0.03% СВБелок оболонки вірусу HIV - 1 (gp41) Nicotiana benthamianaНет даннихТуберкулезний антиген ESAT - 6, злитий з LTBарабідопсіс11-25 мкг / г СВ (РБ - розчинний білок; СВ - ...
