фази розрізняють екстракцію з твердого речовини і екстракцію з розчину (рідинну). За кількістю операцій екстракція може бути одноразовою і багаторазовою. У фармацевтичному аналізі екстракцію широко використовують для розділення компонентів, що входять до складу ЛФ. Крім того, її поєднують з фотометрією в екстракційно-фотометричному методі, заснованому на освіті випробуваним речовиною кольорових продуктів реакції, здатних екстрагуватися яким-небудь органічним розчинником. Потім в органічній фазі виконують фотометричне визначення екстрагованого продукту.
Хроматографічні методи розділення речовин засновані на їх розподілі між двома фазами: рухомою і нерухомою. Рухома фаза - рідина або газ; нерухома - тверда речовина або рідина, адсорбована на твердому носії. Відносна швидкість переміщення частинок вздовж шляху поділу залежить від їх взаємодії з нерухомою фазою. Тому кожна речовина проходить на носії певний шлях. Ставлення шляху переміщення речовини до шляху переміщення розчинника є величина постійна, що позначається Rf. Вона є константою для даних умов поділу і використовується для ідентифікації ЛВ.
Хроматографія на папері. Носієм нерухомої фази (наприклад, води) служить спеціальна хроматографічна папір. Розподіл відбувається між водою, що знаходиться на поверхні паперу, і рухомою фазою, яка являє собою систему з кількох розчинників. Випробування виконують згідно з вимогами ГФ XI (в. 1, с. 98) або ФС (ФСП). Для підтвердження автентичності одночасно хроматографіруют випробний речовина і стандартний зразок. Якщо вони ідентичні, то плями на хроматограмах матимуть однаковий вигляд і рівні значення Rf. Щоб виключити вплив на похибку визначення умов хроматографування, користуються більш об'єктивної константою Rs, яка являє собою відношення величин Rf випробуваного і стандартного зразків. Хроматографію використовують при випробуванні на чистоту. Про наявність домішок судять по появі додаткових плям на хромато грамі. Аналізоване речовина і домішка зазвичай мають різні значення Rf.
Кількісний вміст речовини можна визначити безпосередньо на хроматограмі, використовуючи планіметричний, денситометричний, люмінесцентний та інші методи. Використовують також методи, засновані на Елюювання аналізованого речовини з вирізаного і подрібненого ділянки хроматограми з відповідним плямою. У елюаті зміст випробуваного речовини визначають фотометричним або електрохімічним методом.
Хроматографія в тонкому шарі сорбенту (ТШХ) відрізняється від хроматографії на папері тим, що процес хромато графірованія відбувається на носії (сорбенті), нанесеному тонким шаром на інертну поверхню. Твердий сорбент може бути закріпленим або незакріпленим на цій поверхні. Сорбентом служить силікагель або оксид алюмінію. Для закріплення додають невеликі кількості крохмалю або сульфату кальцію. Використовують також пластинки промислового виготовлення типу «Силуфол УФ - 254», «Сорбфіл» та ін.
Перевагами ТШХ є простота прийомів і обладнання, більш висока чутливість, ніж у паперової хроматографії, стійкість пластинок до температурних і хімічних впливів, значно більші можливості процесів поділу, детектування, елюювання, менша тривалість виконання випробування. Все це створює широкі можливості у використанні ТШХ для виконання випробувань на справжність, чистоту, для кількісного визначення ЛВ в ЛФ.
Двовимірне хроматографування відрізняється повторним (після висушування) пропусканням тієї ж чи іншої рухомої фази, але в перпендикулярному по відношенню до первісного напрямку. При цьому використовують квадратні пластини або аркуші паперу.
У фармацевтичному аналізі широко застосовують поєднання ТШХ з фізико-хімічними методами аналізу. Такі комбіновані методи, як хромато-спектрофотометрія, хромато-флуориметр, хромато-мас-спектроскопія особливо ефективні в аналізі ЛРС і препаратів, що містять велике число супутніх компонентів.
Газорідинна хроматографія (ГРХ) заснована на розподілі компонентів суміші між газовою і рідкою або твердою фазами. Розподіл відбувається в результаті багаторазових актів сорбції та десорбції аналізованих речовин, які вводяться в потік газу-носія, випаровуються і в пароподібному стані проходять через колонку з сорбентом. Тому метод ГЖХ застосуємо для аналізу летких речовин або речовин, які можуть бути переведені в газоподібний стан. Розділені речовини елюіруются з колонки потоком газу-носія, реєструються детектором і фіксуються на хроматограмі у вигляді піків, за якими можна ідентифікувати або визначати зміст кожного компонента суміші.
Газовий хроматограф включає в себе систему вимірювання та регулювання швидкості потоку газу-носія, систему введення проби випробуваного зразка, газохроматографічному колонку, систему термостатування та контролю температури в різних вузлах приладу і систему де...
