використовували такі системи розчинників:
1. н-бутанол - оцтова кислота - вода (4:1:5);
2. бензол - хлороформ - мурашина кислота - етанол - етиловий ефір (30:5:5:5:10);
. хлороформ - бензол - етилацетат (4:8:1).
Аналіз хроматограмм в різних системах розчинників показало наступне:
1. в першій системі флавоноїди проявилися у вигляді однієї плями з Rf=0,71, але не проявилися інші індивідуальні компоненти (Малюнок 2.7, а);
. в другій системі спостерігається часткове розділення флавоноїдів, але плями мають досить низький Rf до 0,1. Однак у даній хроматограмме можна спостерігати інші індивідуальні компоненти такі як фенолокислоти, стерини, терпенові сполуки (Малюнок 2.7, б);
. третя система часто застосовується для терпенових сполук, добре показала поділ фенолокислот кислот від терпенових сполук. Однак флавоноїди також залишилися на старті (Малюнок 2.7, в).
Малюнок 2.7 - Спиртовий екстракт чаги в різних системах розчинників
Отже, найбільш підходяща система розчинників для хроматографування флавоноїдів є система: н-бутанол - оцтова кислота - вода (4:1:5) (Таблиця 2.5).
Таблиця 2.5 - Якісні реакції на флавоноїди
РеактівІсточнік светаОкраска пятенФлавонолыФлавононыХалконыИзофлавоныВидимыйбл-жел-жел-УФ-светкорич-жел-зелкоричПары NH 3 УФ-светяр-зелбл-желкраснаятем5% р-р Na 2 CO 3 Відімийжелжел-зелкраснаябл-жел5% р-р АlCl 3 УФ-светжел-зел-желкоріч
Після хроматографування спиртового витягу в різних системах розчинників і обробки хроматограм специфічними проявниками дійшли висновку, що в спиртовому екстракті чаги міститься представники наступних класів: флавоноїди (халкони), терпенові сполуки, фенолокислоти, стерини.
2.3 Комплексне дослідження хімічного складу березового гриба - чаги
За літературними даними березовий гриб - чага містить велику кількість з'єднань, що належать до різних класів біологічно активних сполук, що вимагає подальшого їх вивчення та ідентифікації.
Для цього послідовно екстрагуючись сировину розчинниками з підвищується градієнтом полярності (гексан, толуол, етилацетат) в апараті Сокслета (Малюнок 2.6) з метою розділення біологічно активних комплексів з полярності.
Березовий гриб - чагу подрібнюємо до дрібнодисперсного стану за допомогою електричного подрібнювача (РМ - 120). Подрібненої чагой у вигляді порошку заповнювали виготовлений з фільтрувального паперу патрон. Потім патрон поміщали в апарат Сокслета і проводимо послідовно екстракцію гексаном, толуолом, етилацетатом до повного вилучення всіх екстрактивних речовин, які розчиняються у гексані, толуолі, етилацетаті. Екстракцію припиняли, коли розчинник в апараті Сокслета припиняв фарбуватися, і залишався безбарвним.
2.3.1 Дослідження гексанової фракції чаги
Згідно зі схемою (Малюнок 2.8) проводимо послідовну екстракцію в апараті Сокслета.
Спочатку проводимо екстракцію гексаном при температурі 78 ° С (Т кип розчинника) до повного вилучення всіх екстрактивних речовин, розчинних у гексані.
Отриманий г...
