ексановий екстракт упарюємо до 10 мл, охолоджуємо і спостерігаємо випадання осаду № 1. Супернатант зливаємо і залишаємо випаруються при нормальних умовах. В результаті чого після 1:00 випаровування також спостерігаємо випадання осаду № 2 в надосадової рідини. Операцію повторюємо, в результаті чого отримуємо п'ять опадів (Таблиця 2.6).
Малюнок 2.8 - Схема послідовної екстракції чаги розчинниками з підвищується градієнтом полярності
Таблиця 2.6 - Вихід опадів гексанової фракції
№ осадкаМасса гексанової осаду, гПроцентний вихід,% 10.090.2020.060.1330.050.1140.030.0750.010.02? 0.240.53
Дослідження опадів гексанової фракції
Отримані опади перекрісталлізовивают етиловим спиртом і проводимо хроматографический аналіз отриманих опадів за допомогою тонкошарової хроматографії на пластинках «Silufol».
Використовували наступні системи розчинників:
1. хлороформ - бензол - етилацетат (4:8:1);
2. бензол - хлороформ - мурашина кислота - етанол - етиловий ефір (30:5:5:5:10).
Отримані хроматограми просушуємо при кімнатній температурі, переглядаємо їх у видимому та УФ - світлі, проявляємо ФМК.
Дослідження осаду № 1
При хроматографическом аналізі осаду № 1 визначаємо три плями.
Розподіл плям в різних системах розчинників показано в таблиці 2.7.
Таблиця 2.7 - Хроматографический аналіз осаду № 1
№ пятнаСістема 1 № пятнаСістема 2Rf пятнаВідімий светУФФМКRf пятнаВід. светУФФМК10.39--син10.41--син20.52--син20.59--син30.61-голсин30.72-голсин
Виходячи з отриманих даних можна припустити, що в осаді № 1 міститься фенолокислоти, так як за літературними даними відомо, що фенолокислоти флюоресцируют блакитним світінням, а при обприскуванні ФМК проявляються синім кольором. Решта два плями можна віднести до терпенові сполуки, так як терпенові сполуки не флуоресціює в УФ-світлі, а з ФМК дають синє забарвлення. Ідентифікацію проводили при «свідках» - бетулін і лупеола, які є основними терпеноїдами берести берези. Плями 1 і 2 виявилися ідентичні бетулін
(Rf 1=0.39; Rf 2=0.41) і лупеола (Rf 1=0.52; Rf 2=0.59).
В результаті хроматографічного аналізу осаду № 1 можна зробити висновок про те, що осад № 1 містить фенолокислоти, терпенові сполуки, а саме бетулін і лупеола.
Дослідження опадів № 2, № 3
Хроматографический аналізі опадів № 2, № 3 виявив їх ідентичність. На хроматограмі виділені чотири плями. Розподіл плям в різних системах розчинників показано в таблиці 2.8.
В обох системах спостерігаємо флюоресценцію блакитним кольором плями з Rf 1=0.73 і Rf 2=0.78, які при обприскуванні ФМК дають синє забарвлення, що припускаємо наявність фенолокислот.
Ідентифікацію проводили при «свідках» - бетулін, бетулінову кислоті і лупеола, які є основними терпеноїдами берести берези. Плями 1, 2, 3 виявилися ідентичні бетулінову кислоті (Rf 1=0.17; Rf 2=0.23), бетулін (Rf 1=0.38; Rf 2=0.47) і лупеола (Rf 1=0.52; Rf 2=0.63).
Відмінність фракції 2 і 3 полягає в тому що, бетулінову кислота в осаді № ...
