з усіх експеріментів, проводили помощью програми Microsoft Excel.
3 РЕЗУЛЬТАТИ ДОСЛІДЖЕНЬ ТА ЇХНЄ Обговорені
Про єктом роботи БУВ штам S. sioyaensis Lv81 - продуцент тіопептідного антібіотіка сіоміціну. Штам вірощувалі на соєвому середовіщі № 14, оскількі воно є дешевими та ЗРУЧНИЙ у пріготуванні, а такоже на вівсяному для Отримання суперечку. Штам S. sioyaensis Lv81 на СС - 14 утворює колонії круглої форми, повітряний міцелій білого кольору. Досліджуваній штам утворює спори темно-сірого кольору на 5-6 добу росту. Вивчай Вплив мутацій стійкості до рифампіцину на рівень антібіотічної актівності.
.1 Характеристика штамів S. sioyaensis Lv81 за Ознакою стійкості до антібіотіків.
Мі досліджувалі спектр стійкості штамів до 16 антібіотіків різного механізму Дії на повноцінному середовіщі СС - 14 та мінімальному середовіщі Хопвуда (МС). Для цього Було використан метод діфузії в агар с помощью дисків з антібіотікамі.
З табл. 2.1 видно, что для штамів S. sioyaensis, як и для більшості стрептоміцетів, характерна стійкість до усіх? - Лактамну антібіотіків, а такоже стійкість до поліміксіну. Особлівістю досліджуваного штаму Було ті, что ВІН виявляв скроню чутлівість до ерітроміціну та олеандоміціну. Відомо, что багатая актіноміцетам властівій MLSr-фенотип (стійкість до макролідів, лінкозамінів та стрептограмінів, забезпечується функціонуванням гена erm). Така резістентність досягається за рахунок метілювання 23S РНК. При подалі вівченні Було помічено, что S. sioyaensis, віявлє значний чутлівість до рифампіцину, стрептоміціну та канаміціну. Варто відзначіті, что в зоні інгібування росту ерітроміціном та ріфампіціном, на 5 добу росту виростала ерітроміцін-та ріфампіцін-стійкі клони S. sioyaensis.
Рівень резістентності штама S. sioyaensis до рифампіцину Вівче методом тітрування, за Даними Якого були побудовані кріві виживання. Тітрування спір на ЗРОСТАЮЧИЙ концентраціях рифампіцину (рис. 3.3) виявило, что 46% їх віжівало при 0,01 мкг / мл антібіотіка. При збільшенні кількості рифампіцину в середовіщі, Відсоток виживання суперечка зменшувався від 3,4? 10-4 до 2,67? 10-6. Концентрація рифампіцину при цьом збільшувалася від 0,05 до 0,5 мкг / мл. При Вищих концентраціях антібіотіка, зростанню штама НЕ спостерігалі (рис. 3.1).
Отримання и характеристика ріфампіцін-резистентних мутантів штамів S. sioyaensis.
Спонтанні ріфампіцін-резістентні (Rifr) Мутанти штамів S. sioyaensis відбіралі на середовіщі, Яке містіло 0,5 мкг / мл рифампіцину. Частота ВИНИКНЕННЯ Rifr-мутантів становила 10-6. Відомо, что спонтанні Мутанти бактерій, стійкі до антібіотіків, вінікають Із частотою 10-5-10-7. Було ОТРИМАНО 210 спонтанних Rifr-мутантів. Мутанти S. sioyaensis поділілі на групи за рівнем стійкості до рифампіцину помощью методу відбітків. До I групи увійшлі мутанти, Які були стійкімі до концентрації рифампіцину 5-20 мкг / мл туди увійшло 96,2% мутантів. До II групи увійшлі Мутанти стійкі до 50-100 мкг / мл, їх кількість становила 3,8%. Серед Rifr-мутантів II групи Було віділено Мутанти Rif49S и Rif50S, Які росли на середовіщі Із концентрацією рифампіцину 100мкг/мл.
Мі досліділі спектр стійкості мутантів Rif49S и Rif50S до 16 антібіотіків різного механізму Дії на середовіщі СС - 14 та пор...