івнялі результати в віхіднім штамів (табл. 3.3). Мі виявило, что Обидва мутанти, як и вихідний штам, були стійкімі до? - Лактамну антібіотіків. Мутант Rif49S, як и Rif50S, на Відміну Від S. sioyaensis, набув стійкості до рифампіцину, про что свідчіть відсутність зони прігнічення вокруг диска з антібіотіком. Обидва Мутанти стали чутлівімі до поліміксіну. Мутант Rif49S є більш чутлівім до олеандоміціну, ерітроміціну, гентаміцину и канаміціну чем вихідний штам та Rifr-мутант Rif50S. У порівнянні Із S. sioyaensis, его Rifr-мутант Rif50S набув стійкості до тетрацікліну.
Відсоток виживання,% Конц. Rif мкг/млRif49SRif50S1001009050085731000113
концентраціямі рифампіцину 100, 500 и 1000 мкг / мл, мі виявило, что мутант Rif49S є Дещо стійкішім до рифампіцину чем Rif50S (рис. 3.4, табл. 3.4).
Малюнок 3.4. Виживання Rifr-мутантів Rif49S та Rif50S на ЗРОСТАЮЧИЙ концентраціях рифампіцину. 1 - Rif49S, 2 - Rif50S, 3 - S.sioyaensis.
.2 мутагенів обробка штамів S. sioyaensis Lv81
Для Отримання індукованіх ріфампіцін-резистентних мутантів штамів S. sioyaensis Lv81 Було використан ультрафіолетове опромінення.
Спори штамів S. sioyaensis Lv81 опромінювалі ультрафіолетовім промінням ПРОТЯГ 120с, Відсоток виживання при цьом стаєш 0,7. После УФ-ОБРОБКИ суперечка S. sioyaensis частота ВИНИКНЕННЯ клонів, стійкіх до рифампіцину, зростан на порядок. Літературні дані вказують на Ефективність поиска мутантів у разі виживання суперечка после ОБРОБКИ УФ в межах 0,1-1,0%.
Таблиця 3.1.
Чутлівість штамів S. sioyaensis Lv81до антібіотіків Із різнім механізмом Дії
Група антибіотиківАнтибіотикиЗона прігнічення 3 добаЗона прігнічення 5 добаMLSОлеандоміцин3030Лінкоміцин1010Еритроміцин4339? - лактамиБензилпеніцилін00Оксацилін00Карбеніцилін00Цефалотин00Ампіцилін00АміноглікозидиКанаміцин2020Стрептоміцин2525Гентаміцин1414Неоміцин1111ІншіХлорамфенікол1616Рифампіцин2929Тетрациклін1212Поліміксин00
Таблиця 3.2.
виживаності штамів S. sioyaensis Lv81 на СЕРЕДОВИЩА Із ЗРОСТАЮЧИЙ концентраціямі рифампіцину.
конц. рифампіцину, мкг / мл% віжіванняlg% виживання 010020,0146,471,660,05 3,4? 10-4 - 3,40,1 1,29? 10-4 - 3,80,2 1,06? 10-5 -4,970,5 2,67? 10-6 - 5,5
3.3 Отримання и Порівняльна характеристика ріфампіцін-резистентних мутантів штамів S. sioyaensis Lv81
Спонтанні ріфампіцін-резістентні (Rifr) Мутанти штамів S. sioyaensis Lv81 відбіралі на середовіщі, Яке містіло 0,5 мкг / мл рифампіцину. Частота ВИНИКНЕННЯ їх булу 10-5. Обробка суперечка УФ-опроміненням привела до Підвищення частоти ВИНИКНЕННЯ мутантів на порядок. Було ОТРИМАНО 210 спонтанних та 368 індукованіх Rifr-мутантів штамів S. sioyaensis Lv81. Отримані Rifr-мутанта Вивчай за рівнем антібіотічної актівності методом агарових блоків Із Використання тест-культури Sarcina lutea.
Порівнявші между собою показатели антібіотічної актівності Rifr-мутантів, спонтанних клонів віхідного штам ТА ЙОГО ж клонів оброблення ультрафіолетом (рис.3.2), виявлено, что індекс продуктівності та Частка плюс-варіантів були Найвищого среди клонів віхідного штам Оброблення УФ и стаєш 6,1 ± 0,08 та 15,3 ± 0,03%...
