му суму флавоноїдів ми порахували можливим визначати в перерахунку на РСО рутина (? Max=407 ± 2 нм). Таким чином, проведені попередні дослідження показали можливість використання диференціальної спектрофотометрії для кількісного визначення флавоноїдів у траві Чорноголова розрізної.
Методика визначення флавоноїдів у траві. Аналітичну пробу сировини подрібнювали до розміру часток, що проходять крізь сито з отворами діаметром 1мм. Близько 1 г (точна наважка) подрібненої сировини поміщали в колбу зі шліфом місткістю 150 мл, додавали 50 мл спирту етилового 70%. Колбу приєднували до зворотного холодильника і нагрівали на киплячій водяній бані протягом 1,5 годин, періодично струшуючи для змивання частинок сировини зі стінок колби. Гаряче витяг фільтрували через паперовий фільтр у мірну колбу місткістю 50 мл так, щоб частинки сировини, не потрапляли на фільтр.
Після охолодження обсяг вилучення доводили спиртом етиловим 70% до мітки і перемішували (розчин А).
У мірну колбу місткістю 25 мл поміщали 5 мл розчину А, 0,5 мл кислоти оцтової 33%, 2 мл розчину алюмінію хлориду 2% і доводили об'єм розчину спиртом етиловим 70% до мітки (розчин Б). Через 45 хвилин вимірювали оптичну щільність розчину Б на спектрофотометрі при довжині хвилі 410 ± 2 нм в кюветі з товщиною робочого шару 10 мм.
Зміст суми флавоноїдів у перерахунку на рутин і абсолютно суху сировину у відсотках (Х) обчислюють за формулою 7:
(7)
де Ах - оптична щільність випробуваного розчину;
Асm - оптична щільність розчину стандартного зразка;
MСM - маса стандартного зразка рутина, г;
m - маса наважки сировини, г;
W - втрата в масі при висушуванні сировини,%.
В якості розчину порівняння використовували розчин, що складається з 5 мл розчину А, 0,5 мл розчину кислоти оцтової 33% і доведений спиртом етиловим 70% до мітки в мірній колбі місткістю 25 мл. Паралельно вимірювали оптичну щільність розчину РСО рутина (малюнок 11).
Приготування розчину РСО рутина.
Близько 0,05 г (точна наважка) (ФС 42-2508-96), висушеного при температурі 132-135 ° С протягом 2-х годин, поміщали в мірну колбу місткістю 100 мл і розчиняли в 70 мл спирту етилового 95%, доводили до мітки цим же розчинником (розчин РСО рутина).
мл розчину РСО рутина поміщали в мірну колбу місткістю 25 мл, додавали 10 мл спирту етилового 70%, 0,5 мл розчину кислоти оцтової 33% і 2 мл розчину алюмінію хлориду 2% і доводили об'єм розчину спиртом етиловим 70% до мітки , примушували. Через 45 хвилин вимірювали оптичну щільність отриманого розчину щодо розчину порівняння, приготованого за методикою: 2 мл розчину РСО рутина поміщали в мірну колбу місткістю 25 мл, додавали 10 мл спирту етилового 70%, 0,5 мл розчину кислоти оцтової 33%, доводили об'єм розчину спиртом етиловим 70% до мітки і перемішували.
Розчин стійкий протягом 30 днів при зберіганні в темному місці в добре закупореній склянці.
Приготування спиртового розчину алюмінію хлориду 2%.
2,0 г алюмінію хлориду безводного або 3,6 г алюмінію хлориду 6-водного (ГОСТ 3759-75, ч. д. а. ), розчиняють при нагріванні на водяній бані в 80,0 мл спирту етилового 95% в мірній колбі місткістю 100 мл, охолоджують, доводять об'єм розчину спиртом етиловим 95% до мітки і фільтрують. Розчин придатний протягом 3-х місяців [31].
Малюнок 11 - Диференціальний спектр поглинання РСО рутина
Малюнок 12 - Диференціальний спектр поглинання суми флавоноїдів спиртового витягу трави Чорноголова розрізної
Статистично оброблені результати визначення суми флавоноїдів у шести серіях трави Чорноголова розрізної представлені в таблиці 9.
Таблиця 9 - Зміст флавоноїдів у траві Чорноголова розрізної
№Навеска, гНайдено,% Метрологічні характерістікі11,00460,72=0,73
=0,0251
=0,0102
? хср=0,0263
e=3,63 21,00540,7530,99940,7041,00860,7650,99920,7061,00350,72
Результати аналізу показують, що вміст флавоноїдів у траві Чорноголова розрізної в перерахунку на рутин становить 0,73 ± 0,0263% (e=3,63).
Висновки на чолі
1. Проведено фармакогностичне дослідження трави Чорноголова розрізної, що дозволило встановити основні морфолого-анатомічні (діагностичні) ознаки сировини.
2. Визначено загальні числові показники сировини трави Чорноголова розрізної: вологість (7,43 ± 0,0641%), загальна зола (6,79 ± 0,1422%), зола, нерозчинна в 10% HCI (0,14 ± 0,0050% ), екстрактивні речовини - вода очищена (28,42 ± 0,3949%), спирт етиловий 40% (28,99 ± 0,3894%), спирт етиловий 70% (26,62 ± 0,3345%), спирт етиловий 95% (7,81 ± 0,2111%).
. З...
