фічних зв'язувань досягається інкубацією мембрани в розбавленому розчині білка - зазвичай бичачого сироваткового альбуміну або знежиреного сухого молока з невеликим відсотком детергента типу Tween 20 або Triton X - 100. Білок з розбавленого розчину зв'язується з мембраною в тих місцях, де немає досліджуваного білка. В результаті антитіла при їх додаванні можуть зв'язуватися тільки з специфічними сайтами зв'язування на досліджуваних білках. Блокування дозволяє досягати чистого фону і виключає отримання хибнопозитивних результатів.
. Детекція. Після блокування мембрани 3-х кратно відмивають буфером. Потім досліджувані білки детектируют з використанням антитіл методом «сендвіча»: спочатку білки зв'язуються з первинними (моно-або поліклональних) антитілами, які в свою чергу зв'язуються з вторинними антитілами, кон'югованими з ферментами (пероксидазою хрону або лужною фосфатазою). Візуалізація досліджуваного білка досягається шляхом проведення відповідної біохімічної реакції з утворенням продукту, який визначається колориметричним, хемілюмінесцентним, флюоресцентним методами детекції. Хемилюминесцентнаядетекция має більш високу чутливість в порівнянні з колориметричним методом. Взаємодія люминола і пероксиду в присутності пероксидази хрону, кон'югованій з вторинними антитілами, призводить до утворення окисленого люминола, який володіє люмінесцентним світінням при 425 нм. Інтенсивність хемілюмінесценції пропорційна кількості досліджуваного білка (антигену). Детекція хемілюмінесценції (як і флуоресценції) здійснюється за допомогою гель-документувала системи ChemiDocMP, яка володіє високим дозволом і чутливістю. Система ChemiDocMP забезпечена CCD камерами високого дозволу і потужною системою охолодження, що дозволяє точно фіксувати нечіткі, розпливчасті смуги. Наявність програмного забезпечення дозволяє проводити якісний і кількісний аналіз отриманих даних у порівнянні зі стандартними білками.
.3 АНАЛІЗ ЕПІДЕМІОЛОГІЧНОЇ СИТУАЦІЇ
В світі:
Станом на кінець 2011 року заразилися ВІЛ-інфекцією 60 мільйонів чоловік, з них:
· 25 мільйонів померли
· 35 мільйонів живуть з ВІЛ-інфекцією.
З 35 мільйонів живуть з ВІЛ-інфекцією частина в живих завдяки прийому антиретровірусної терапії. Необхідні ліки отримують менше половини з 9,5 млн носіїв, які потребують противірусної терапії <# «justify"> · 58% - внутрішньовенне введення наркотиків нестерильними інструментами
· 40% - гетеросексуальний контакт.
У Далекосхідному федеральному окрузі:
В останні роки істотно збільшився охоплення лікуванням ВІЛ-інфікованих пацієнтів ДВФО, що, в першу чергу, пов'язано з реалізацією пріоритетного національного проекту в сфері здравоохраненія.Так, в цілому по округу в 2013 році з 2821 інфікованих, потребують лікування, його отримали 2804 людини, або 99,4% (у 2007 р. - 88,3%, в 2008 р. - 98,9%, в 2009 р. - 99,4%, в 2010 р. -99,2%, в 2011 р. - 99,1%, в 2012 р. - 99,3%) - табл. 9. На більшості адміністративних територій Далекосхідного федерального округу охоплення лікуванням склав 100%. (Таблиця 4). Станом, на кінець 2013 підлягало диспансерному спостереженню 10444 ВІЛ-інфікованих пацієнтів ДВФО (у 2009 р. - 7384, в 2010 - 8394, в 2011 р. - 9024, в 2012 р. - 9514). З них 9312 людини (89,2%) було охоплено таким ...
