н була показана незабаром після відкриття системи інтерферону Айзексом/Франція /.
Методика полягає в наступному.
З периферичної крові донорів виділяють лейкоцитарну масу і піддають культивуванню в суспензії. Використовують середовище № 1, в яку додають 0,0015 од/мл інсуліну і 100-200 од/мл нативного інтерферону. До лейкоцитам в концентрації (5-10) * 10 6 клітин/мл в якості індуктора додають вірус хвороби Ньюкасла з інфекційним титром не нижче 10 8 /мл ТЦД 50 в культурі курячих фіброластов. Продукувати інтерферон відокремлюють від культурального середовища шляхом центрифугування.
ОТРИМАННЯ БЕТА-ІНТЕРФЕРОНУ
Ще в 60-ті роки було показано, що інтерферон, що провокується клітинами амніону людини, а також шкірно-м'язовими фібробластами, за своїми властивостями відрізняється від лекоцітарного інтерферону. В даний час для отримання бета-інтерферону використовують диплоїдні клітини людини. Суперіндукціі здійснюють різними впливами - дихлоро-1-бета-D-рибафуранозилбенэимидазолом, хлороквіну, нейтральним червоним, УФ ~ радіацією та ін
ОТРИМАННЯ ГАММА-ІНТЕРФЕРОНУ
Гамма-інтерферон є продуктом Т-лімфоцитів людини. За останнє десятиліття завдяки посиленому вивченню імунної відповіді і властивостей іммуннокомпетентних клітин значно розширилися уявлення про функції Т-лифоцитов, а також про продукти, що виділяються Т-лімфоцитами - лімфокінами, володіють властивостями біорегуляторів.
Гамма-інтерферон, або імунний інтерферон, також є одним з активних регуляторів імунної відповіді, оскільки володіє супрессорной активністю щодо продукції антитіл, викликає активацію природних кілерів.
Гамма-інтерферон продукують активовані Т-лімфоцити.
Для отримання великих кількостей гамма-інтерферону з периферичної крові виділяють Т-лімфоцити і обробляють мітогеном або антилімфоцитарну сироваткою. Наприклад, до культури з концентрацією лімфоцитів (I-2) * 10 5 в 1 мл додають стафілококовий ентеротоксин в концентрації 0,02 мкг/мл.
Культури інкубують в середовищі з людським альбуміном. Інтерферон виділяють з культуральної середовища. Можливо повторне стимулювання культури і повторне продукування інтерферону.
ЛЮДСЬКИЙ ЛЕЙКОЦИТАРНИЙ ІНТЕРФЕРОН
Характеристика готового продукту,
Людський лейкоцитарний інтерферон є видоспецифічні гликопротеидом, що синтезуються донорськими лейкоцитами у відповідь на вплив интерфероногена.
Специфічність препарату визначається такими ознаками:
А) противірусною активністю . У розведенні, відповідному титру активності, препарат повинен захищати культуру людських клітин від цитопатичної дії індикаторного вірусу, взятого в дозі 100 ТЦД 50
Б) стійкістю активності до дії нуклеаз-РНК-ази і ДНК-ази;
В) чутливістю активності до дії трипсину - при концентрації ферменту 300 мкг/мл протягом I години при 37 В° С препарат повністю і...
