ом соляної кислоти, ретельно перемішують. Отримують розчин з концентрацією 17,680 ммоль/дм3.
Приготування робочого розчину креатиніну. Обсяг 1 см3 стандартного розчину креатиніну з концентрацією 17,680 ммоль/дм3 переносять в мірну колбу місткістю 25,0 см3, доводять до мітки дистильованою водою і ретельно перемішують. Отримують розчин з концентрацією креатиніну 0,707 ммоль/дм3.
Приготування стандартного розчину креатину. На аналітичних вагах зважують 0,11593 г креатиніну з похибкою 2,5? 10-5 р. Наважку кількісно переносять у мірну колбу місткістю 50,0 см3, доводять до мітки дистильованою водою, ретельно перемішують. Отримують розчин з концентрацією 17,680 ммоль/дм3.
Приготування робочого розчину креатину. Обсяг 1,00 см3 стандартного розчину креатину з концентрацією 17,680 ммоль/дм3 переносять в мірну колбу місткістю 25,0 см3, доводять до мітки дистильованою водою і ретельно перемішують. Отримують розчин з концентрацією креатину 0,707 ммоль/дм3. Приготування розчину соляної кислоти з концентрацією 0,4 моль/дм3. Розчин готують за фиксаналов. Вміст ампули розчиняють в мірній колбі місткістю 250,0 см3, доводять до мітки дистильованою водою, ретельно перемішують.
2.3 Встановлення оптимальних умов експерименту
Зміст креатину визначають методом, заснованим на реакції Яффе (малюнок 6).
Малюнок 6 - реакція Яффе
В основі лежить взаємодія креатиніну, похідного креатину, з пікрати-іоном, утворюється пікрати креатиніну, пофарбований в оранжево-червоний колір.
2.3.1 Визначення довжини хвилі
Для визначення поглинання електромагнітного випромінювання пікринової кислотою вимірюють значення оптичної щільності в інтервалі довжин хвиль [505; 515] нм відносно води [18]. Результати представлені в таблиці 1.
Таблиця 1 - Фрагмент спектру пікринової кислоти
?, нмА5050, 0385080,010508,50,0085090,005509,50,0015100,0005120,0015150,001
В інтервалі довжин хвиль [509,5; 515] нм пікринова кислота не поглинає електромагнітне випромінювання.
абсорбційна розчинів пікринової кислоти і пікрати-іона при однаковій молярної концентрації ідентична внаслідок наявності однакових хромофорних груп у структурі. Тому в якості розчину порівняння для визначення оптичної щільності креатинін-пікратний комплексу можна використовувати дистильовану воду.
Для визначення довжини хвилі, при якій відбувається максимальне поглинання креатинін-пікратний комлексом, вимірюють оптичні щільності комплексу з концентрацією креатиніну 0,014 ммоль/дм3 в інтервалі [509,5; 514] нм відносно води (таблиця 2).
Таблиця 2 - Залежність абсорбційна креатинін-пікратний комплексу від довжини хвилі
?, нмА509, 50,4695100,4685110,4505120,4345130,4185140,402
Максимальна оптична щільність креатинін-пікратний комплексу спостерігається при довжинах хвиль 509,5; 510 нм. При менших значеннях довжин хвиль поглинає і пікринова кислота. Відбувається аддитивное додавання оптичних густин двох компонентів.
.3.2 Залежність абсорбційна креатинін-пікратний комплексу від часу
