ь велику частину довжини гена. І інтрони, і Екзони транскрибуються в мРНК. Після цього некодуючі послідовності вирізаються з пре-мРНК через процес сплайсингу. Тільки після перетворення 5 - і 3 - решт РНК може називатися зрілою. Кожен акт сплайсингу видаляє одне інтрон, проходячи через послідовність фосфорит-транспортних реакцій. Вони з'єднують дві екзона, видаляючи інтрон як «Лариат». Механізм, який каталізує сплайсинг пре-мРНК, досить рухливий для того, щоб охоплювати все розмаїття інтронів, які присутні у звичайній еукаріотичної клітці.
Присутність великих некодуючих послідовностей в ДНК дозволяє скомбінувати Екзони різних генів. Це полегшує процес створення нових білків. Підтвердженням є факт, що багато білки сучасних клітин складаються з однакових протеїнових доменів.
Транскрипти багатьох еукаріотичних генів проходять сплайсинг в декількох точках, дозволяючи одному гену проводити набір різних білків. У результаті РНК-сплайсинг дозволяє еукаріотів збільшити кодує потенціал своїх геномів. (Alberts В. еt al, 2007)
Малюнок 1.2 Схема сплайсингу
. Редагування
Упродовж процесингу перетворювати РНК піддається редагуванню. Воно найчастіше проходить шляхом хімічної модифікації підстав і описано у всіх типах РНК еукаріот. Цей процес зазвичай відбувається в ядрі клітини, цитозолі, мітохондріях і пластидах.
Механізми редагування РНК включають в себе модифікацію нуклеозидів (наприклад, дезамінування цитидину в уридин або аденозину в інозин) і вставки нуклеотидів без матриці. Редагування РНК у разі мРНК значно змінює послідовність кодованого поліпептиду. Трансльований білок може сильно відрізнятися від закодованого в ДНК генома. (Brennicke A. et al, 1999)
Редагування РНК починається зі справно первинного невідредаговану транскрипту з guide RNA (провідною РНК), яка містить комплементарні послідовності близько сайтів вбудовування чи видалення. Утворений двуцепочечную ділянку покривається едітосомой - великим многобелковим комплексом, катализирующим редагування РНК. (Alfonzo JD et al, 1997) Едітіосомний комплекс починає вбудовування уридин по першому становищу неспарених нуклеотидів. Утворюються комплементарні зв'язку з guide RNA. Вбудовування триває до того моменту, коли у провідній РНК зустрічаються A або G і зупиняється при появі C або U. (Blum B. et al, 1990)
У ході редагування відбувається розрізання по сайту, де не утворюються комплементарні пари між guide RNA і нередактірованним транскриптом. Наступна стадія каталізується ферментом (кінцевий U-трансферазой), який додає U з 3 - UTP. (Simpson L., Thiemann OH, 1995) «Відкриті» кінці утримуються іншими білками едітосомного комплексу. U-специфічна екзорібонуклеаза, видаляє неспарені уридин. Едітосомний комплекс здатний редагувати мРНК лише в напрямку від 3 -кінців до 5 -кінців. (Hajduk S.L., Sabatini R.S., 1998)
. Поліметілірованіе
Після закінчення транскрипції метилтрансферази виробляють ферментативний перенесення метильних груп на молекули РНК. Метилирование некодуючих РНК на 3'-кінці стабілізує ці молекули. Найбільш поширеною модифікацією є метилювання залишків аденозину по положенню N6 з утворенням N6-метіладенозіна. Передбачається, що метилювання має регуляторну функцію. (Wang X. et al, 2014)
2. Канонічний і альтернативний сплайсинг РНК в клітинах людини
2.1 Канонічний сплайсинг
Механізм сплайсингу пре-мРНК розпізнає три порції РНК-молекул: 5 - сплайс-сайт, 3 - сплайс-сайт і розгалуження інтронів послідовності, яке формує основу виділяється Лариат. Кожна з цих точок має універсальну нуклеотидну послідовність, яка залишається однаковою від інтрони до Інтрони і дозволяє клітині зрозуміти, де стартувати сплайсингу.
При сплайсинге ключові події здійснюються за допомогою РНК. Ці молекули звичайно коротше 200 нуклеотидів, і 5 з них залучені в головні форми пре-мРНК сплайсингу. Вони відомі як snRNA (від англ. Small nuclear RNA). Кожна з них ускладнюється не менше ніж сімома білковими субодиницями, формуючи snRNP (small nuclear ribonucleic protein). Ці snRNP формують основу сплайсосома.
сплайсосома - складний механізм. Багато вчених вважають, що вона існує в клітці ще до початку процесу сплайсингу. У процесі вирізування інтронів, розпізнавання 5 і 3 - cплайс-вузлів і розгалуження інтронів послідовності відбувається завдяки парності snRNA і універсальних РНК-послідовностей.
Малюнок 2.1 Схема будови і роботи сплайсосома
Гідроліз АТФ не вимагається безпосередньо в процесі сплайсингу. Однак він необхідний для об'єднання і перетвор...
