ще. Скрутніше всього диференціація вірусу віспи натуральної від вірусу вакцини. Тут додатково може бути застосоване внутрішньо-шкірне (або накожное) зараження вірусом віспи натуральної кроликів. Воно дає позитивний результат лише при введенні концентрованого або слаборазведенного матеріалу і зазвичай не передається в пасажах від кролика до кролика. На відміну від цього, вірус вакцини викликає шкірні ураження в незначних дозах і вміст вакцинальних бульбашок легко передається в пасажах.
Зараження кроликів (Пауля метод). Раетертие кірки, лусочки, а також рідина, отриману з оспін, наносять на рогівку очей кроликів, попередньо провівши скарифікацію поверхні шляхом легких надрізів слизової оболонки. При наявності в досліджуваному матеріалі життєздатного оспенного вірусу через 36-48 годин виникають дрібні округлі вузлики висотою до 1 мм-оспенний кератит. Заражений очей витягують і занурюють у сулемовий спирт (суміш 30 мл етилового спирту, 4 г сулеми і 90 мл дистильованої води). p> Позитивна реакція Пауля визначається тоді, коли через кілька хвилин після фіксації на місці прищепних надрізів виявляються вузлики, що різко відрізняються своїм білим кольором від навколишньої здорової прозорої тканини.
Метод Пауля менш чутливий і точний, ніж виділення вірусу в курячих ембріонах і тканинних культурах.
В
Серологічні методи діагностики
Поява і наростання титру протівооспенного антитіл в крові у хворих і видужуючих визначаються серологічними реакціями з використанням специфічного антигену, приготовляемого найчастіше з вірусу вакцини, що вирощується в розвиваються курячих ембріонах.
Діагностичне значення мають поява антитіл в крові у хворих, що не були вакциновані в попередні два роки, або чотириразовий і більше приріст антитіл, що виявляється при повторне взяття крові та одночасному дослідженні отриманих сироваток. Останнє дозволяє зробити більш обгрунтований висновок про природу диагностируемого захворювання. У хворих віспою натуральної антитіла з'являються в кількості, виявляємо серологічними реакціями на 3-6-й день хвороби, досягають максимального титру на 2-3-му тижні і потім поступово знижуються.
Для серологічних досліджень зазвичай застосовують затримку гемаглютинації як найбільш просту за техніці виконання і разом з тим досить точну реакцію. Антиген готують із хоріо-аллантоісной оболонок 11-13-денних запліднених курячих яєць, попередньо заражених вірусом вакцини в розведенні 1: 100. Якщо використовується дермовакціна, то вона попередньо обробляється антибіотиками для звільнення від бактеріальної мікрофлори. Після інкубації заражених яєць (три дні при 1 В° 37 В°) оболонки витягають, ретельно розтирають у ступці і розводять фізіологічним розчином.
Використовують розтерті оболонки у вигляді 20% суспензії (за вагою), попередньо отцентріфугіроваіной при 1500 оборотах протягом 15 хв.
Антигеном є надосадова рідина, яку зберігають до 3 місяців і більш тривал...
