окремлюють спиртовий шар і фільтрують. Тіохром, отриманий в результаті окислення тіаміну, обумовлює синю флуоресценцію.
3. Тіамін дає опади з деякими загальними алкалоїдними реактивами, наприклад з реактивом Драгендорфа (пікринова кислота не дає осаду).
Кількісне визначення
1. Після нейтралізації (За бромтимолового синьому) тіамін-бромід визначається Аргентометріческіе. p> 2. Інший метод заснований на властивості вітаміну В1 утворювати з диазотированного пара-аміно-ацетофенону з'єднання фіолетово-червоного кольору, яке нерастворимо у воді, з багатьма органічними розчинниками утворює кольорові розчини, що допускають порівняння з еталонними розчинами. З органічних розчинників застосовують звичайно ксилол або толуол. p> Для визначення тіаміну, розчиненого в однорідному безбарвному розчиннику, немає необхідності витягати кольорове з'єднання з розчину. У цих випадках додають ізопропанол в кількості, достатньому для розчинення кольорового з'єднання, і проводять визначення за стандартним розчину.
Для аналізу беруть таку кількість препарату, в якому міститься 100 мікрограмів (0,0001 г) тіаміну. Еталон готують розчиненням 50 мг вітаміну Вх (точна наважка) в 500 мл 50% за обсягом) етанолу, який містить 1 краплю 4 н. соляної кислоти. Хоча цей еталонний розчин можна зберігати при кімнатній температурі протягом декількох місяців, віддають перевагу все ж готувати його на термін не більше 1 місяця. Крім еталонного розчину заготовляють: 1) 0,03%-ного розчину пара-аміно-ацетофенону в 0,2 н. соляній кислоті; 2) 0,1%-ний розчин нітриту натрію, 3) 1 н. і 2,5 н. розчини їдкого натру, 4) 50%-ний етанол (за об'ємом), 5) толуол; 6) ізопропанол і 7) 4 н. соляну кислоту.
Для приготування реактиву під назвою діазораствор А в невеликий склянці змішують 10 мл розчину пара-аміно-ацетофенону і 2 мл розчину нітриту натрію і охолоджують не менше 2 хвилин у крижаній воді. Перед користуванням до суміші додають 3 мл 1 н. розчину їдкого натру і збовтують. Реактив під назвою діазораствор Б готують так само, як і розчин А, з тією лише різницею, що замість 1 н. розчину їдкого натру до розчину Б додають 2,5 н. розчину їдкого натру.
Випробуваний ампульний розчин змішують з такою кількістю перегнанной води, щоб кожен мілілітр суміші містив близько 100 мікрограмів тіаміну. У калібровану пробірку на 10 мл вливають 1 мл суміші, додають 2 мл 50%-ного етанолу і поміщають у водяну баню при температурі 60 В°. Через 1 хвилину підливають 1 мл діазораствора А, сильно збовтують і знову залишають у лазні на 2 - 3 хвилини. Потім суміш охолоджують, додають 1 краплю 4 н. соляної кислоти і ізопропанол до мітки, збовтують і порівнюють в колориметрі з контрольним розчином, виготовленим змішанням 1 мл води з 1 мл еталонного розчину тіаміну, 1 мл 50% етанолу і 1 мл діазораствора А за методом, описаним вище.
3. Для визначення вітамін В1 за іншому методу розчиняють 0,4-1,5 мг його в 10 мл води, додають 0,5 мл реак...
