и вирішення виникаючих проблем внесенням різних хімічних модифікацій ODN. Хімічної модифікації можуть піддаватися як азотисті основи, так і цукрово-фосфатний остов, що призводить до підвищення його нуклеазоустойчівості ODN та ефективності його зв'язування з комплементарної послідовністю. Підвищення ефективності доставки ODN в клітку намагаються вирішити введенням до її складу за одного з кінців різних груп, що полегшують проходження через мембрану [1,3]. p align="justify"> В основному виділяють два механізми дії антисмислових олигонуклеотидов: арешт трансляції за рахунок зв'язування регуляторної області і розщеплення РНК у складі РНК-ДНК-гетеродуплекса. Ведення модифікацій може різне вплив з того чи іншого механізму, що слід враховувати при виборі варіанту модифікації [1,3,4]. br/>
1.1 Механізм дейтсвія антисмислових олигонуклеотидов
При взаємодії антисмислового олігонуклеотиду з мРНК відбуваються дві події: стерическое блокування і розщеплення мРНК-мішені РНКази H. Для одних олигонуклеотидов відбуваються обидві події (РНКаза H-компетентні олігонуклеотиди), для інших - тільки стерическое блокування (РНКаза H-незалежні). Ці два варіанти засновані на різних клітинних механізмах. Найбільш широкий спектр молекулярних механізмів витрачається при використанні другого варіанту. Це досягається адресацією олігонуклеотидів до певних регуляторним послідовностям, як у пре-мРНК, так і в мРНК. У разі пре-мРНК адресація ODN до граничної області між Інтроном і екзонах порушує сплайсинг, що призводить або до його зупинки, або до утворення мРНК, що кодує нефункціональний білок (див. рис.1). Іншим перспективним ділянкою зв'язування ODN в пре-мРНК є 5 -кінцевий регіон. Взаємодія ODN з цим регіоном призводить до блокування кепірованія [2,4,5].
При взаємодії ODN з мРНК відбувається порушення її трансляції, а отже і синтезу білка за рахунок блокування руху рибосоми по мРНК або навіть її складання в залежності від положення сайту зв'язування [4].
В
Рис.1. Різні механізми дії антисмислових олігонуклеотидів. br/>
РНКаза H-компетентні ODN можуть бути адресовані до будь-якого ділянці пре-мРНК і мРНК, так як їх дія заснована на активації РНКази H, субстратом якої є РНК у складі дуплексів РНК - ДНК. Однак багато хімічно модифіковані антисмислового олігонуклеотиди нездатні включати цей механізм через високу стерическую специфічності РНКази H. Це пов'язано з тим, що більшість модифікацій призводить до зміни параметрів спіралі дуплексу ODN - РНК, і вони перестають бути субстратами для РНКази H.
антисмислового олігонуклеотиди другого покоління - модифіковані по 2 -положенню залишку цукру, не є субстратами РНКази Н, тому потрібно шукати інші розщеплюють агенти (штучні РНКази). Ряд малих молекул (інтеркалятора, полікатіон) здатні розщеплюв...
