Дослідників приваблює доступність і швидкість визначення пігментів, тому в багатьох гідробіологічних роботах прийнято виражати велика кількість водоростей кількістю хлорофілу [1].
Мета роботи - вивчення літературних даних по закономірності формування та розподілу пігментних характеристик і первинної продукції у водосховищах і методах їх аналізу.
1. Методи визначення вмісту рослинних пігментів у водоростях
фотосинтетичний пігмент водойму фітопланктон
Методи визначення вмісту фотосинтетичних пігментів у фітопланктоні можна розділити на дві основні групи: екстрактивні і безекстрактние.
Сутність першої групи методів полягає в добре відомої здатності деяких органічних розчинників (метанол, еталон, ацетон, сірчаний і петролейний ефіри, бензин) витягувати зелений пігмент з рослинної клітини.
Екстракти являють собою складні суміші присутніх у фітопланктоні хлорофілів, продуктів їх трансформації, а також ще однієї групи жиророзчинних пігментів - каротиноїдів (ізомерів каротину і ксантофиллов). В отриманих екстрактах пігментів визначають або сумарний вміст зелених пігментів і каротиноїдів, або після хроматографічного розділення методом паперової, колоночной або тонкошарової хроматографії враховують вміст різних компонентів суміші [2].
Залежно від типу використовуваних приладів екстракційні методи поділяють на калориметричні, спектрофотометричні і флуорометріческіе. За допомогою сучасної оптичної апаратури Спектрофотометричне і флуорометріческое визначення вмісту хлорофілу в об'ємі води можливо проводити і безекстрактним методом.
При використанні калориметрического методу в сумарному екстракті визначають тільки загальний вміст хлорофілів. Калориметр екстрактів проводять за допомогою фотоелектрокалориметри, при цьому для розрахунку вмісту хлорофілу використовують калібрувальні криві.
При проведенні гідробіологічних досліджень використовують найчастіше метод спектрофотометрії визначення хлорофілу. Метод заснований на вимірюванні кількості світла, що поглинається розчином пігментів при заданих довжинах хвиль.
Основні етапи спектрофотометричного визначення пігментів наступні: концентрування планктону у відібраних пробах води, витяг пігментів, вимір оптичної щільності (або пропускання) екстракту, розрахунок концентрацій.
Зазвичай проби води фільтрують через ацетатцелюлозних мембранні фільтри за допомогою фільтрувального приладу Зейца. У зарубіжних дослідженнях найбільш поширений метод фільтрації через скло-волоконні фільтри, що вважається більш ефективним.
Першорядне вимога до екстрактам - відсутність неспецифічного поглинання світла, що виникає за рахунок суспензій і розчинних забарвлених сполук, серед яких можуть бути деривати деяких пігментів. Це поглинання контролюється вимірюванням оптичної щільності в крайній довгохвильовій області видимого спектра на довжині хвилі 750 нм. Абсолютно чистий розчин пігментів, тобто з нульовою оптичною щільністю або 100%-ним пропусканням на цій довжині хвилі дуже важко отримати на природному матеріалі. Допустимою вважається величина, рівна 0,005 в розрахунку на 1 см шару розчину при оптимальній оптичної щільності.
Важливе значення має оцінка продуктів перетворення ...
