реагуючих на туберкулін. У РСК велику роль грає якість антигену. Кращим з них раніше вважали метиловий антиген Негр і боке. В останні роки більш ефективні були визнані сложносмешанний антиген Т.А. Луценко і комплексний антиген Ю.Я.Кассіча. У основу сложносмешанного антигену був узятий полісахаридних комплекс, отриманий з мікобактерій туберкульозу. До складу комплексного антигену Ю.Я. Кассіч входить полісахаридних комплекс, метиленовий екстракт туберкульозних мікобактерій і водний екстракт легеневої тканини здорової великої рогатої худоби. p> Для постановки реакції досліджувані сироватки інактивують у водяній бані при 60 С протягом 30хв. Антиген і комплемент титрують. У пробірки розливають випробовувані сироватки в розведеннях: 1:5, 1:10, 1:20, 1:40 і 1:80 по 0,25 мл і додають антиген і комплемент теж по 0,25 мл. Потім штативи з пробірками ставлять на 30хв. в водяну баню при 37 - 38 С, потім виймають і додають у кожну пробірку гемолітичну систему, яка складається з 0,25 мо 2%-ної суспензії еритроцитів барана і 0,25 мл гемолизина в робочому титрі. Потім штативи знову поміщають в водяну баню на 15хв. Реакцію враховують попередньо після лазні і остаточно через 16-18 годин. Оцінку проводять за затримці гемолізу. Отримання позитивної РСК в титрі 1:20 і вище вказує на наявність у тваринного туберкульозного процесу.
Реакцію гемаглютинації запропонував Мідлбрук і Дюбо. Сутність її полягає в Ом, що антиген, що міститься в витяжках мікобактерій, має здатність адсорбуватися на поверхні еритроцитів і сенсибилизировать їх до сироватці крові туберкульозних тварин, яка викликає аглютинацію таких еритроцитів. p> Реакція гемолізу полягає в тому, що після врахування реакції гемаглютинації в кожну пробірку додають комплемент. У пробірках, де містилася сироватка туберкульозних тварин, настає гемоліз.
Алергічна діагностика. У тварин, заражених туберкульозом, через 15-20 днів з'являється алергія, що виражається підвищенням чутливості до продуктів життєдіяльності мікобактерій (токсинів).
Упродовж багатьох років для алергічної діагностики застосовували тільки альттуберкулін Коха. В даний час у ссавців тварин і птахів застосовують альттуберкулін і сухий очищений туберкулін (ППД - протеїн пуріфіед дериват).
альттуберкулін готують на біофабриках, вирощуючи культури мікобактерій туберкульозу бичачого і людського виду на м'ясо - пептонном гліцериновому бульйоні протягом 6-8 тижнів, після чого культуру збовтують і стерилізують в автоклаві при 120 С 30хв., А потім випарюють при 80-90 С до 1/10 початкового об'єму, відстоюють і фільтрують через фільтр Зейтца. Отриманий таким чином туберкулін прозорий, коричневого кольору, має специфічний запах. Він містить близько 40-50% гліцерину. p> ППД готують, вирощуючи культури мікобактерій туберкульозу на синтетичному середовищі. У фільтрат 8-тижневої культури додають трихлоруксусную кислоту для осадження протеїнів. Осад обробляють, очищаючи від слідів...
